靶向siRNA阻断Wnt/β-catenin信号通路对子宫内膜异位症裸鼠模型异位子宫内膜VEGF和MMP-9表达的影响

来源 :华中科技大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:jhh760606
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目的利用siRNA载体介导的RNA干扰技术靶向沉默β-catenin以阻断Wnt/β-catenin信号通路,观察对子宫内膜异位症裸鼠模型异位子宫内膜血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)表达的影响,探讨Wnt/β-catenin信号通路促进异位内膜组织粘附、侵袭和转移的作用。方法采用人子宫内膜异体移植方法构建子宫内膜异位症裸鼠模型。将18只子宫内膜异位症裸鼠随机分为3组(n=6):siRNA干扰组、阴性对照组和空白对照组,前两组每日分别腹腔注射100μL siRNA转染复合物(含β-catenin siRNA3μg和转染试剂7.5μg)和阴性对照转染复合物(含阴性对照si RNA3μg和转染试剂7.5μg)1次,共注射5次。末次腹腔注射后24 h断颈处死裸鼠,观察盆、腹腔病灶形成情况,取异位病灶标本。Real time PCR和免疫组织化学检测异位内膜组织β-catenin、VEGF和MMP-9 mRNA和蛋白的表达。结果实验裸鼠共20只,18只成模成活。Real timePCR检测结果显示,与阴性对照组和空白对照组相比,siRNA干扰组β-catenin、VEGF和MMP-9 mRNA表达明显降低(均P<0.05),而后两者之间差异无统计学意义(均P>0.05)。免疫组化结果显示,si RNA干扰组β-catenin、VEGF和MMP-9表达明显减弱,显著低于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05),而后两者之间差异无统计学意义(均P>0.05)。结论阻断Wnt/β-catenin信号通路能明显抑制子宫内膜异位症裸鼠模型异位内膜组织VEGF和MMP-9mRNA和蛋白表达。Wnt/β-catenin信号通路可能促进子宫内膜异位症患者在位子宫内膜的异位种植。
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