【摘 要】
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目的:探讨皮层肌动蛋白结合肽（Cortactin）对剪应力（SS）诱导的气道黏液高分泌的影响及其关键靶点。方法:体外培养气道上皮细胞Beas-2B,并随机分为6组:空白对照组、SS组、SS+Wild-C
【机 构】
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海南医学院第一附属医院呼吸内科; 俄罗斯医学科学院远东呼吸生理与病理研究中心; 白俄罗斯国立杨卡·库帕拉大学运动与康复医学系;
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(81660010,81611530713,81811530063)
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目的:探讨皮层肌动蛋白结合肽（Cortactin）对剪应力（SS）诱导的气道黏液高分泌的影响及其关键靶点。方法:体外培养气道上皮细胞Beas-2B,并随机分为6组:空白对照组、SS组、SS+Wild-Cortactin组、SS+pc DNA3-Cortactin421-MU组、SS+pcDNA3-Cortactin466-MU组、SS+pcDNA3-Cortactin482-MU组。用Western blot法检测Cortactin蛋白、p-Cortactin蛋白表达水平,RT-PCR、ELISA法分别检测MUC5AC转录水平和MUC5AC的分泌量。结果:转染Cortactin各型重组表达载体后细胞Cortactin蛋白明显增加,提示转染成功。转染Wild-Cortactin后再予剪应力处理,细胞的p-Cortactin蛋白、MUC5AC mRNA及蛋白表达显著增加。而转染pc DNA3-Cortactin466-MU后,细胞p-Cortactin蛋白、细胞培养上清液MUC5AC的相对分泌量显著下降,但MUC5AC的转录水平无明显影响。结论:在剪应力刺激诱导的气道上皮细胞MUC5AC高分泌过程中,Cortactin具有重要的介导作用,且Y466为其介导该过程的潜在关键作用靶点。
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