基于LC-MS研究芍药汤对溃疡性结肠炎大鼠粪便代谢产物的影响

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目的:基于液相色谱-质谱联用(LC-MS)探究芍药汤对2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzenesulfonic acid,TNBS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)大鼠的粪便代谢产物的影响。方法:将SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、芍药汤组(11.1 g·kg-1),除正常组外,采用TNBS诱导UC大鼠模型,除芍药汤组外,各组分别予以生理盐水,均治疗7 d,观察各组大鼠一般情况和疾病活动指数(DAI),采用苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织病理学改变,免疫组化法(IHC)检测结肠组织中白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-22(IL-22)蛋白表达,采用LC-MS技术检测大鼠粪便样本,并通过主成分分析(PCA),偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)分析数据,对筛HMDB数据库及KEGG数据库,结合文献筛查,筛选差异代谢物,结合Metabo Analyst 5.0检索,得到通路富集分析。结果:UC大鼠灌胃芍药汤可使DAI评分降低,与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜结构破坏,黏膜下层炎性细胞浸润,结肠组织IL-8蛋白表达水平明显升高(P<0.01),IL-22蛋白表达水平明显升高(P<0.05),与模型组比较,芍药汤组大鼠结肠损伤减轻,结肠组织IL-8蛋白表达水平明显降低(P<0.01),IL-22蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。经过筛选处理,和模型组比较,芍药汤组共鉴定出15个差异代谢物,代谢物主要涉及通路包括不饱和脂肪酸的生物合成、亚油酸代谢、萜类骨架生物合成、卟啉和叶绿素代谢、氨基糖和核苷酸糖代谢、嘧啶代谢、类固醇激素生物合成。结论:芍药汤对UC具有治疗作用,其抗炎作用可能与改善脂质代谢、调节辅因子和维生素代谢、碳水化合物代谢的异常状态有关。
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