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阐述显微镜透明厚样本成像原理和三维显微图像带约束的迭代解卷积复原算法。根据显微镜透明厚样本成像原理,对已知三维清晰图像进行退化处理,并且使用带约束的迭代解卷积算法去除退化图像中的散焦信息。试验结果表明,图像散焦信息的干扰得到有效的去除,清晰度和信噪比得到明显的改善,并且该算法可以恢复成像过程中丢失的部分频率成分,实现超分辨率复原。当迭代次数较大时,复原效果优于邻域法和线性方法。