【摘 要】
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目的:探讨用重组PCR技术对人单核细胞趋化蛋白-1(hμMCP-1)基因cDNA进行缺失突变,构建N末端缺失7个氨基酸的编码序列hμMCP-1突变体-hμMCP-1(7ND)cDNA,以期实现7ND基因治疗
【机 构】
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山东大学齐鲁医院心内科,山东大学医学院分子生物学实验室,烟台毓璜顶医院
【基金项目】
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中国科学院资助项目，卫生部临床学科重点项目
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目的:探讨用重组PCR技术对人单核细胞趋化蛋白-1(hμMCP-1)基因cDNA进行缺失突变,构建N末端缺失7个氨基酸的编码序列hμMCP-1突变体-hμMCP-1(7ND)cDNA,以期实现7ND基因治疗抑制MCP-1活性.方法:根据缺失前后的两段基因片段A和B分别设计两对引物即内引物与外引物,第一轮PCR反应通过每段各自的内外引物,分别获得加有互补末端的A+和B+DNA片段.然后进行第二轮PCR反应,以第一轮PCR产物为模板,加入两外引物,获得大量重组体AB基因片段,将PCR产物与T载体连接,进行酶切
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