维生素C抗氧化-同位素内标稀释-超高效液相色谱-串联质谱 同时测定新生期大鼠海马体神经递质的含量

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脑区神经递质的测定对于研究神经系统的作用机制具有重要意义.该研究建立了同位素内标稀释-超高效液相色谱-串联质谱同时测定双酚A暴露后大鼠海马体中5种神经递质含量的方法,包括谷氨酸、γ-氨基丁酸、乙酰胆碱、多巴胺以及5-羟色胺.选用2%(体积分数)乙酸水-甲醇(9:1,v/v)溶液配制标准样品及溶解样品,以Ulti-mate AQ-C18(150 mm×4.6 mm,3μm)为分离柱,0.1%(体积分数)甲酸水和甲醇为流动相,在28℃柱温下,梯度洗脱,所有化合物在3 min内出峰.添加维生素C能显著减少多巴胺和5-羟色胺在前处理以及样品储存过程中的氧化,极大地提高神经递质的稳定性,从而准确定量.该方法标准曲线线性关系良好,相关系数R2>0.998,检出限和定量限低,日内和日间精密度为0.39%~13.6%,加标回收率为92.9%~119%,实际进样残留低,已被成功地应用于新生期双酚A暴露后大鼠海马体神经递质含量的测定.
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