小鼠原始生殖细胞分离培养方式和生物特性研究

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目的探索一种简单高效的分离、培养小鼠原始生殖细胞(PGCs)的方法,为小鼠模型提供充足的PGCs来源。方法体外分离小鼠12.5dpc胚胎生殖嵴,剪碎后用含血清、胰岛素-转铁蛋白-硒添加剂、卵泡刺激素、重组表皮生长因子的α-MEM培养基进行组织块贴壁培养;于倒置显微镜下观察细胞形态,采用流式细胞术检测阶段性特异性胚胎抗原,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)、细胞免疫荧光等方法检测干细胞的多能性基因Oct4及减数分裂Ⅰ期的几个特异性基因的表达。结果体外分离培养的小鼠PGCs具有良好的细胞形态、极强的
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