【摘 要】
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建立了简便、灵敏地检测烟草中菌核净残留的时间分辨荧光免疫分析方法(TRFIA),及配套的无净化的快速前处理技术.采用镧系元素螯合物Eu-N1标记亲和纯化后的羊抗兔IgG示踪抗体.
【机 构】
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江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所,南京,210014;云南省烟草科学研究所,玉溪,653100;芬兰图尔库大学,图尔库20540
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建立了简便、灵敏地检测烟草中菌核净残留的时间分辨荧光免疫分析方法(TRFIA),及配套的无净化的快速前处理技术.采用镧系元素螯合物Eu-N1标记亲和纯化后的羊抗兔IgG示踪抗体.采用间接竞争TRFIA法建立了菌核净标准抑制曲线,方法的检出限为2.0 μg/L;抑制终浓度I30为32.00 μg/L;检测线性范围为4～128 μg/L.考察了丙酮提取后33％,10％和1％的烟草基质对菌核净-TRFIA分析方法的影响,表明在1％烟叶基质条件下,建立的菌核净的抑制曲线的线性范围与标准抑制曲线趋于平行,确定烟草样品的前处理稀释倍数为100倍,计算得到基质影响因子(Im)为17.1.对烟叶样品中添加1,7和24 mg/L的菌核净标样,连续3d的添加回收实验表明,方法的回收率为73％～128％,相对标准标准偏差(RSD)在4.3％～13.2％之间；烟草中菌核净的实际最低检出限为1 mg/L.本方法可望用于烟草中菌核净残留的快速筛选检测.
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