【摘 要】
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目的探讨二烯丙基三硫化物（DATS）对TNF-α诱导的人RA-成纤维样滑膜细胞（FLS）增殖以及炎症因子、MMPs和血管内皮生长因子（VEGF）分泌的影响。方法体外培养RA-FLS，采用不同浓度DATS处理细胞，通过CCK-8法测定细胞增殖的活性，加用TNF-α刺激后，通过实时荧光定量（q）-PCR、ELISA检测IL-1β、MMP-1、VEGF的mRNA和蛋白的表达水平，采用单因素方差分析比较多
【机 构】
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海军医科大学附属长海医院风湿免疫科，上海 200433,海军医科大学附属长海医院风湿免疫科，上海 200433,上海长宁区光华中西医结合医院骨科 200052,上海长宁区光华中西医结合医院骨科 200
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目的探讨二烯丙基三硫化物（DATS）对TNF-α诱导的人RA-成纤维样滑膜细胞（FLS）增殖以及炎症因子、MMPs和血管内皮生长因子（VEGF）分泌的影响。
方法体外培养RA-FLS，采用不同浓度DATS处理细胞，通过CCK-8法测定细胞增殖的活性，加用TNF-α刺激后，通过实时荧光定量（q）-PCR、ELISA检测IL-1β、MMP-1、VEGF的mRNA和蛋白的表达水平，采用单因素方差分析比较多组定量资料，采用LSD-t法比较组间均数。
结果分离出的RA-FLS中CD90、CD29表达的阳性率>90%。经100 μmol/L、200 μmol/L、300 μmol/L DATS处理，细胞增殖活力分别为[（98.92±0.40）%、（95.91±0.32）%、（94.05±0.24）%]，与正常对照组比较增殖活性均下降，加入200 μmol/L、300 μmol/L DATS的实验组差异有统计学意义（t=4.46，P<0.05；t=7.98，P<0.05）。加用TNF-α刺激后，与实验对照组相比，加入100 μmol/L DATS实验A组中的IL-6 mRNA相对表达量升高[（1.14±0.04）倍，t=5.74，P<0.05]，但蛋白变化差异无统计学意义，MMP-1、VEGF蛋白及mRNA变化差异无统计学意义。加入200 μmol/L DATS实验B组中IL-6、MMP-1、VEGF蛋白水平分别为[（108.0±4.7）ng/L，t=-63.79，P<0.05；（26.0±1.0）ng/L，t=-9.68，P<0.05；（57.9±0.7），t=-34.59，P<0.05]、mRNA较实验对照组的相对表达量分别为[（0.42±0.06）倍，t=-23.47，P<0.05；（0.14±0.03）倍，t=-36.59，P<0.05；（0.36±0.09）倍，t=-13.1，P<0.05]；加入300 μmol/L DATS实验C组中IL-6、MMP-1、VEGF蛋白水平[（24.2±2.3）ng/L，t=-88.69，P<0.05；（22.7±1.0）ng/L，t=-14.13，P<0.05；（34.5±1.7），t=-48.45，P<0.05]，mRNA较实验组对照组的相对表达量为[（0.041±0.027）倍，t=-38.48，P<0.05；（0.027±0.027）倍，t=-41.22，P<0.05；（0.131±0.047）倍，t=-17.74，P<0.05]，均较实验对照组明显降低，且2组蛋白水平间比较差异有统计学意义（t=-24.89，P<0.05；t=-4.45，P<0.05；t=-13.87，P<0.05）。
结论DATS浓度≥200 μmol/L时能够抑制RA-FLSs的增殖，并抑制其分泌IL-6、MMP-1、VEGF，而且呈剂量依赖关系。
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