【摘 要】
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目的观察凋亡相关蛋白Caspase-3体外对PIAS1蛋白的酶切作用,为后续研究奠定基础。方法以HEK293T细胞表达PIAS1蛋白,采用免疫共沉淀(Co-IP)实验观察其与Caspase-3间的结合作用
【机 构】
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第二军医大学长海医院临床神经医学中心神经外科,复旦大学生命科学学院遗传学研究所,
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目的观察凋亡相关蛋白Caspase-3体外对PIAS1蛋白的酶切作用,为后续研究奠定基础。方法以HEK293T细胞表达PIAS1蛋白,采用免疫共沉淀(Co-IP)实验观察其与Caspase-3间的结合作用;采用体外蛋白酶切实验检测Caspase-3对PIAS1的酶切作用。结果 Co-IP实验发现体外Caspase-3可与PIAS1蛋白结合;蛋白酶切实验发现PIAS1的酶切片段。结论 Caspase-3与PIAS1在体外具有相互作用,PIAS1体外可被Caspase-3酶切,为后续研究奠定了基础。
Objective To observe the effect of Caspase-3 on the PIAS1 protein cleavage in vitro, and lay the foundation for further study. Methods The PIAS1 protein was expressed in HEK293T cells. The co-immunoprecipitation (Co-IP) was used to observe the binding of PIAS1 to Caspase-3. The digestion of PIAS1 by Caspase-3 was detected by protease digestion in vitro. Results Co-IP experiments found that in vitro Caspase-3 with PIAS1 protein binding; protease cleavage experiments found PIAS1 digestion. Conclusion Caspase-3 interacts with PIAS1 in vitro and PIAS1 can be digested by Caspase-3 in vitro, which lays the foundation for further research.
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