背景:补肾方药的动物及细胞实验研究提示具有防治骨质疏松及改善骨代谢作用,但补肾方药研究具有相当的复杂性,目前复方中药研究多采用的血清药物代谢动力学的方法却具有局限性,使有效作用成分及药物物质基础尚不确定。目的:通过采用补肾方药有效成分配伍,在不同浓度和时间下,对新生SD大鼠成骨细胞进行干预性培养,并对其增殖与分化情况进行测定,从而确定补肾方药对成骨细胞时效和量效关系,为补肾方药防治骨质疏松症提供实验依据。方法:体外培养原代新生24 h的SD大鼠成骨细胞,采用补肾方药的"补药"和"泻药"有效化学成分不同比例配伍,实验分3组,即补>泻组、补<泻组和对照组,补>泻组、补<泻组分别加入质量浓度10,20,30μg/L的补肾方药无血清培养基干预成骨细胞培养,在培养24,48,72 h分别检测细胞的增殖,在培养48,72 h测定成骨细胞的碱性磷酸酶分泌。结果与结论:质量浓度为10μg/L,在培养48 h,补>泻组具有明显促增殖作用(P<0.05);质量浓度为20μg/L时,各时间点补>泻组、补<泻组无明显差别,但与对照组比较具有明显增殖作用;质量浓度为30μg/L,在培养48 h,补>泻组具有明显促增殖作用最强(P<0.05),72 h时增殖作用减弱;质量浓度为10μg/L,在培养72 h测得补>泻组具有促碱性磷酸酶分泌作用,质量浓度为20μg/L,在培养24 h以补<泻组最明显(P<0.05);质量浓度为30μg/L,在培养72 h补>泻组促明显的促碱性磷酸酶分泌作用最佳(P<0.05)。结果证实,补肾方药有效成分按补>泻组配伍比例对成骨细胞增殖、分化作用最强,且存在时-效及量-效关系。