【摘 要】
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目的观察茶多酚单体表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对中波紫外线(UVB)诱导小鼠皮肤色素沉着及黑素小体转移和降解的影响,探讨自噬在其中的作用机制。方法将16只C57/BL6雌性小鼠32只鼠耳用简单随机方法随机等分为4组:①丙酮对照组:每日予丙酮溶液外涂耳部皮肤;②EGCG组:每日予10 g/L EGCG丙酮溶液外涂;③UVB照射组:单次500mJ/cm2 UVB照射,照射2 h后每日外涂丙酮溶
【机 构】
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目的观察茶多酚单体表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对中波紫外线(UVB)诱导小鼠皮肤色素沉着及黑素小体转移和降解的影响,探讨自噬在其中的作用机制。
方法将16只C57/BL6雌性小鼠32只鼠耳用简单随机方法随机等分为4组:①丙酮对照组:每日予丙酮溶液外涂耳部皮肤;②EGCG组:每日予10 g/L EGCG丙酮溶液外涂;③UVB照射组:单次500mJ/cm2 UVB照射,照射2 h后每日外涂丙酮溶液;④UVB + EGCG组:单次UVB照射2 h后每日外涂EGCG丙酮溶液。10 d后处死小鼠,收集耳部皮肤,透射电镜观察黑素小体及自噬体超微结构变化,免疫组化法检测蛋白酶活性受体2(PAR2)及微管相关蛋白轻链3(LC3)在表皮中的表达,免疫印迹法检测PAR2、Rab27a及LC3在表皮中的表达。
结果丙酮对照组、UVB照射组、UVB + EGCG组和EGCG组间黑素小体及自噬体数量差异均有统计学意义(H值分别为12.249、13.888,均P < 0.05);与丙酮对照组小鼠皮肤角质形成细胞内黑素小体数量(1.00 ± 0.41)、自噬体数量(1.00 ± 0.46)相比,UVB照射组黑素小体(1.85 ± 0.32)和自噬体(1.94 ± 0.64)均显著增加(均P<0.05);相较于UVB照射组,UVB + EGCG组黑素小体(1.30 ± 0.44)显著减少(P<0.05),而自噬体(3.03 ± 0.75)则明显增加(P<0.05)。免疫组化显示,4组间PAR2在表皮中的表达差异有统计学意义(H = 18.700,P < 0.05);与UVB照射组(12.54 ± 3.07)比较,UVB + EGCG组PAR2表达(7.94 ± 4.57)显著减少(Z = 2.143,P < 0.05);但4组表皮LC3表达均不明显,表达水平差异无统计学意义(H = 5.051,P>0.05)。免疫印迹显示,4组间PAR2、Rab27a表达及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值差异均有统计学意义(F值分别为18.739、25.967、24.022,均P < 0.05);与UVB照射组(PAR2 3.12 ± 0.61,Rab27a 1.42 ± 0.07,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ1.24 ± 0.07)比较,UVB + EGCG组PAR2(0.91 ± 0.54)、Rab27a(0.99 ± 0.16)表达均显著减少(P < 0.05),而LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值(1.67 ± 0.08)则显著增加(P < 0.05)。
结论外用EGCG能有效抑制UVB诱导的皮肤色素沉着,其作用机制可能与抑制黑素小体转运及促进黑素小体自噬有关。
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