评价微小RNA-125b(miR-125b)在小鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)中的作用。
方法健康雄性C57BL/6小鼠40只,体重25~30 g,2~3月龄,采用随机数字表法分为4组(n=10):假手术组(Sham组)、VILI组、VILI+miR-125b阴性对照组(VILI+NC组)和VILI+miR-125b过表达组(VILI+miR-125b agomir组)。VILI+NC组和VILI+miR-125b agomir组分别经气管内滴入miR-125b阴性对照或miR-125b agomir转染复合物50 μl,48 h后制备VILI模型。采用大潮气量(40 ml/kg)机械通气4 h制备VILI。机械通气4 h时采集股动脉血样测定PaO2,然后处死小鼠,取肺组织,测定湿重/干重(W/D)比值,光镜下观察病理学结果,并行肺损伤评分。VILI+NC组和VILI+miR-125b agomir组收集支气管肺泡灌洗液(BALF),采用ELISA法测定TNF-α和IL-6的浓度;采用TUNEL法测定肺组织细胞凋亡情况,计算细胞凋亡指数,采用Western blot检测肺组织caspase-3表达水平,采用RT-PCR法检测肺组织miR-125b表达水平。
结果与Sham组比较,VILI组、VILI+NC组和VILI+miR-125b agomir组PaO2降低,肺组织W/D比值和肺损伤评分升高,VILI组和VILI+NC组肺组织miR-125b表达下调(P<0.05);与VILI组比较,VILI+miR-125b agomir组PaO2升高,肺组织W/D比值和肺损伤评分降低,miR-125b表达上调(P<0.05),肺组织病理学损伤减轻,VILI+NC组上述各指标差异无统计学意义(P>0.05);与VILI+NC组比较,VILI+miR-125b agomir组BALF中TNF-α及IL-6浓度和细胞凋亡指数、肺组织caspase-3表达水平均降低(P<0.05)。
结论miR-125b参与了VILI的内源性保护机制。