【摘 要】
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将D-阿洛酮糖3-差向异构酶（DPE）基因利用PCR进行扩增,与枯草芽孢杆菌载体pMA5连接,构建重组质粒pMA5-cbdpe.重组质粒转入枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis WB800感受态细胞,利用
【机 构】
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食品科学与技术国家重点实验室江南大学,江南大学食品学院
【基金项目】
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国家863计划项目(2013AA102102);国家自然科学基金项目(31230084)
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将D-阿洛酮糖3-差向异构酶（DPE）基因利用PCR进行扩增,与枯草芽孢杆菌载体pMA5连接,构建重组质粒pMA5-cbdpe.重组质粒转入枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis WB800感受态细胞,利用卡那霉素筛选和PCR鉴定,获得一株DPE重组枯草芽孢杆菌菌株.该重组菌株无需诱导即可产生DPE酶,18h时酶活可达6.8 U/mL.该酶最适pH为7.0,最适温度为55℃,与大肠杆菌表达的DPE酶酶学性质相似.结果表明,DPE酶可在枯草芽孢杆菌中表达.
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