【摘 要】
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目的克隆人2型大麻受体(hCB2)基因,并构建相应的稳定表达细胞株。方法利用人T淋巴细胞株HPB-ALL的总RNA,以RT-PCR及酶切、连接等分子生物学方法克隆hCB2基因于质粒载体pFlag-
【机 构】
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第三军医大学西南医院检验科,第三军医大学军事预防医学院劳动卫生学教研室,第三军医大学军事预防医学院劳动卫生学教研室,第三军医大学军事预防医学院劳动卫生学教研室,美国密西根州立大学药理与毒理系 重庆40
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目的克隆人2型大麻受体(hCB2)基因,并构建相应的稳定表达细胞株。方法利用人T淋巴细胞株HPB-ALL的总RNA,以RT-PCR及酶切、连接等分子生物学方法克隆hCB2基因于质粒载体pFlag-CMV-3内,以HEK293细胞构建稳定表达细胞株,以Western blot方法利用蛋白标记Flag的单克隆抗体(Anti-Flag)和CB2多克隆抗体(Anti-CB2)同时检测质粒的表达。结果酶切及测序结果表明hCB2基因克隆成功,Western blot检测结果表明Anti-Flag和Anti-CB2都能检测Flag-hCB2蛋白。结论成功克隆hCB2基因,并获得稳定表达细胞株,同时证实Anti-CB2多克隆抗体有效。
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