【摘 要】
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目的建立狂犬病病毒快速检测法。方法根据狂犬病病毒核蛋白基因的保守序列分别设计两对引物及其相应的TaqMan探针。构建pMD-N重组质粒，建立荧光定量RT-PCR绝对定量标准品，并对
【机 构】
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吉林大学畜牧兽医学院,军事医学科学院军事兽医研究所
【基金项目】
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国家863计划项目(No．2006AA022456);国家科技部支撑计划项目(No．2006BAD06A09);国家科技攻关计划课题(No．2004BA519A48)。
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目的建立狂犬病病毒快速检测法。方法根据狂犬病病毒核蛋白基因的保守序列分别设计两对引物及其相应的TaqMan探针。构建pMD-N重组质粒，建立荧光定量RT-PCR绝对定量标准品，并对反应体系进行优化，建立绝对定量的标准曲线。利用10倍稀释法检验方法的灵敏度并与普通RT—PCR法进行比较；作重复性和特异性检验后进行临床标本的检测。结果构建了绝对定量的参照质粒，标准曲线相关系数为0．998。狂犬病病毒荧光定量RT—PCR检测反应的灵敏度为10个TCID50；5种非狂犬病病原体检测均为阴性。结论建立的狂犬病病毒的
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