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【中图分类号】R446.6【文献标识码】A【文章编号】1550-1868（2015）04
【摘要】 目的 探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）方法在诊断梅毒螺旋体（TP）感染中的临床应用价值。方法 选择我院接收的梅毒患者68例，采用甲基胺红不加热血清试验（TRUST）和ELISA试剂分别检测68例梅毒患者和30例自身免疫性疾病患者的血清样本，将检测结果与梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）检测结果进行对比，比较TRUST和ELISA试剂的假阳性率和假阴性率。 结果 ELISA方法检测的假阳性率和假阴性率分别显著性低于TRUST（P<0.05）。结论 ELISA方法检测TP结果可靠，可以作为筛选和确认梅毒的首选方法。
【关键词】梅毒螺旋体（TP）； 感染 ；酶联免疫吸附试验
梅毒是一种传染性强、危害性大的性疾病，病原体是梅毒螺旋体（TP）。血清学检测是诊断梅毒的常用实验室检测方法，即非梅毒螺旋体抗原血清试验和梅毒螺旋抗原血清试验[1]。一般用甲基胺红不加热血清试验（TRUST）、不加热血清反应素试验（USR）等非梅毒螺旋体抗原血清试验，其特异性较差，存在一定的假阳性率和假阴性率，常用于大样本的初步筛选。TP-ELISA属于梅毒螺旋抗原血清试验，敏感性和特异性均较强，常用作临床梅毒的确认实验，其特异性强，灵敏度高，操作简单方便，可全自动化，可以用于大样本的检测。作者采用ELISA方法对本院就诊的梅毒患者68例进行检测，并与TRUST、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）相对照，探讨其在TP感染诊断中临床应用价值，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 我院2013年1月至2015年2月经过临床诊断和血清学检测诊断梅毒患者68例，其中Ⅰ期10例、Ⅱ期50例、Ⅲ期6例、潜伏期2例。同期内，我院接收自身免疫性疾病患者30例，均采用临床诊断和自身血清抗体检测，排除了梅毒阳性患者。
1.2 血清样本采集 采集梅毒患者68例和自身免疫性疾病患者30例的静脉血清样本6 ml，冷藏备用。
1.3 仪器与试剂 奥地利TECAN生产的全自动酶标仪、美国BIO-RAD洗板机、恒温水浴箱、上海荣盛生物技术有限公司的TRUST试剂盒（批号20100907）、广州中山生物公司的ELISA试剂盒（批号20100713）、日本富士会社TPPA试剂盒（批号20101006）。
1.4 检测方法 采用TRUST和ELISA试剂分别检测研究对象血清样本，具体操作步骤严格按照试剂盒说明书要求进行检测。比较两种方法检测结果的假阳性率和假阴性率。
1.5 统计学处理 采用SPSS18.0统计软件进行所有数据处理，计数资料与百分率表示，组间比较采用χ2检验，P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 血清TRUST、ELISA、TPPA检测结果 TRUST试验检测阳性50例、阴性48例，其中潜伏期2例、Ⅰ期梅毒2例、Ⅱ期梅毒4例，以及已经治愈的患者10检测结果均是阴性。TRUST假阳性率、假阴性率分别为16.67%（5/30）、26.47%（18/68）。与TPPA检测结果比较，TRUST假阳性率、假阴性率与TPPA有明显差异（χ2=6.37，P<0.05）。TP-ELISA试验检测阳性68例、阴性30例，TP-ELISA的假阳性率、假阴性率均为0。TP-ELISA与TPPA检测结果完全一致，无假阳性和假阴性结果。TP- ELISA方法检测的假阳性率和假阴性率分别显著性低于TRUST（χ2=7.19，P<0.05）。
3 讨论
梅毒螺旋抗原血清试验包括梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA）、TPPA、荧光梅毒螺旋体吸收试验（FTA-ABS）、TP-ELISA等试验，其中TP-ELISA和TPPA较常用。TPPA是TPHA改良后的方法，用TP致敏明胶颗粒将TPHA中的致敏红细胞替换，TP致敏明胶颗粒可以与血清中抗-TP结合发生凝集反应。TPPA减少了TPHA出现的假阳性和假阴性现象，检测结果更准确可靠，且特异性强，操作方便，但是价格较昂贵，不适合大样本及疗效观察应用。TP-ELISA是近年随着梅毒螺旋基因工程的研制进而建立的诊断梅毒的新方法[2]。人体受到TP感染后4周～8周在血清中才能检测到一定数量的抗体，特异性抗体较非特异性抗体早出现。梅毒患者治疗后，非特异性抗体会逐渐转阴。TRUST不适用于Ⅰ期梅毒的诊断，该方法对潜伏期梅毒敏感性也较低。本研究中发现，TRUST的假阳性率、假阴性率分别为16.67%（5/30）、26.47%（18/68）。有假阳性结果也有假阴性结果，表明TRUST用于梅毒螺旋体感染的初步筛查也不适用。TP-ELISA方法采用酶联免疫吸附技术检测血清中存在的特异性抗体，可以作为梅毒螺旋体感染的单一筛选方法。本研究中发现，TP-ELISA试验检测阳性68例、阴性30例，TP-ELISA的假阳性率、假阴性率均为0。TP-ELISA与TPPA检测结果完全一致，无假阳性和假阴性结果。减轻或消除沟状效应的影响可以通过稀释法或ELISA二步法，进而保证检测结果的敏感度和可靠性。有文献报道，在孵育过程中适当振荡可以消除沟状效应。综上所述，TP-ELISA方法利用了基因重组工程合成抗原，检测血清中特异性抗体，特异性强、灵敏度高，与TPPA检测结果保持一致。TP-ELISA方法检测结果可靠，可以作为筛选和确认梅毒的首选方法，值得临床推广应用。
参考文献
[1]马聪， 王芳， 徐武夷. 梅毒螺旋体实验室检测技术的研究进展[J]. 中华医院感染学杂志，2012，32（12）：958-950
[2] 丛宪玲， 姜日花 ，朱明姬， 等. 580例梅毒患者实验室检测结果分析[J].中国实验诊断学， 2013， 27（3）： 264-265.
【摘要】 目的 探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）方法在诊断梅毒螺旋体（TP）感染中的临床应用价值。方法 选择我院接收的梅毒患者68例，采用甲基胺红不加热血清试验（TRUST）和ELISA试剂分别检测68例梅毒患者和30例自身免疫性疾病患者的血清样本，将检测结果与梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）检测结果进行对比，比较TRUST和ELISA试剂的假阳性率和假阴性率。 结果 ELISA方法检测的假阳性率和假阴性率分别显著性低于TRUST（P<0.05）。结论 ELISA方法检测TP结果可靠，可以作为筛选和确认梅毒的首选方法。
【关键词】梅毒螺旋体（TP）； 感染 ；酶联免疫吸附试验
梅毒是一种传染性强、危害性大的性疾病，病原体是梅毒螺旋体（TP）。血清学检测是诊断梅毒的常用实验室检测方法，即非梅毒螺旋体抗原血清试验和梅毒螺旋抗原血清试验[1]。一般用甲基胺红不加热血清试验（TRUST）、不加热血清反应素试验（USR）等非梅毒螺旋体抗原血清试验，其特异性较差，存在一定的假阳性率和假阴性率，常用于大样本的初步筛选。TP-ELISA属于梅毒螺旋抗原血清试验，敏感性和特异性均较强，常用作临床梅毒的确认实验，其特异性强，灵敏度高，操作简单方便，可全自动化，可以用于大样本的检测。作者采用ELISA方法对本院就诊的梅毒患者68例进行检测，并与TRUST、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）相对照，探讨其在TP感染诊断中临床应用价值，现报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料 我院2013年1月至2015年2月经过临床诊断和血清学检测诊断梅毒患者68例，其中Ⅰ期10例、Ⅱ期50例、Ⅲ期6例、潜伏期2例。同期内，我院接收自身免疫性疾病患者30例，均采用临床诊断和自身血清抗体检测，排除了梅毒阳性患者。
1.2 血清样本采集 采集梅毒患者68例和自身免疫性疾病患者30例的静脉血清样本6 ml，冷藏备用。
1.3 仪器与试剂 奥地利TECAN生产的全自动酶标仪、美国BIO-RAD洗板机、恒温水浴箱、上海荣盛生物技术有限公司的TRUST试剂盒（批号20100907）、广州中山生物公司的ELISA试剂盒（批号20100713）、日本富士会社TPPA试剂盒（批号20101006）。
1.4 检测方法 采用TRUST和ELISA试剂分别检测研究对象血清样本，具体操作步骤严格按照试剂盒说明书要求进行检测。比较两种方法检测结果的假阳性率和假阴性率。
1.5 统计学处理 采用SPSS18.0统计软件进行所有数据处理，计数资料与百分率表示，组间比较采用χ2检验，P<0.05为差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 血清TRUST、ELISA、TPPA检测结果 TRUST试验检测阳性50例、阴性48例，其中潜伏期2例、Ⅰ期梅毒2例、Ⅱ期梅毒4例，以及已经治愈的患者10检测结果均是阴性。TRUST假阳性率、假阴性率分别为16.67%（5/30）、26.47%（18/68）。与TPPA检测结果比较，TRUST假阳性率、假阴性率与TPPA有明显差异（χ2=6.37，P<0.05）。TP-ELISA试验检测阳性68例、阴性30例，TP-ELISA的假阳性率、假阴性率均为0。TP-ELISA与TPPA检测结果完全一致，无假阳性和假阴性结果。TP- ELISA方法检测的假阳性率和假阴性率分别显著性低于TRUST（χ2=7.19，P<0.05）。
3 讨论
梅毒螺旋抗原血清试验包括梅毒螺旋体血球凝集试验（TPHA）、TPPA、荧光梅毒螺旋体吸收试验（FTA-ABS）、TP-ELISA等试验，其中TP-ELISA和TPPA较常用。TPPA是TPHA改良后的方法，用TP致敏明胶颗粒将TPHA中的致敏红细胞替换，TP致敏明胶颗粒可以与血清中抗-TP结合发生凝集反应。TPPA减少了TPHA出现的假阳性和假阴性现象，检测结果更准确可靠，且特异性强，操作方便，但是价格较昂贵，不适合大样本及疗效观察应用。TP-ELISA是近年随着梅毒螺旋基因工程的研制进而建立的诊断梅毒的新方法[2]。人体受到TP感染后4周～8周在血清中才能检测到一定数量的抗体，特异性抗体较非特异性抗体早出现。梅毒患者治疗后，非特异性抗体会逐渐转阴。TRUST不适用于Ⅰ期梅毒的诊断，该方法对潜伏期梅毒敏感性也较低。本研究中发现，TRUST的假阳性率、假阴性率分别为16.67%（5/30）、26.47%（18/68）。有假阳性结果也有假阴性结果，表明TRUST用于梅毒螺旋体感染的初步筛查也不适用。TP-ELISA方法采用酶联免疫吸附技术检测血清中存在的特异性抗体，可以作为梅毒螺旋体感染的单一筛选方法。本研究中发现，TP-ELISA试验检测阳性68例、阴性30例，TP-ELISA的假阳性率、假阴性率均为0。TP-ELISA与TPPA检测结果完全一致，无假阳性和假阴性结果。减轻或消除沟状效应的影响可以通过稀释法或ELISA二步法，进而保证检测结果的敏感度和可靠性。有文献报道，在孵育过程中适当振荡可以消除沟状效应。综上所述，TP-ELISA方法利用了基因重组工程合成抗原，检测血清中特异性抗体，特异性强、灵敏度高，与TPPA检测结果保持一致。TP-ELISA方法检测结果可靠，可以作为筛选和确认梅毒的首选方法，值得临床推广应用。
参考文献
[1]马聪， 王芳， 徐武夷. 梅毒螺旋体实验室检测技术的研究进展[J]. 中华医院感染学杂志，2012，32（12）：958-950
[2] 丛宪玲， 姜日花 ，朱明姬， 等. 580例梅毒患者实验室检测结果分析[J].中国实验诊断学， 2013， 27（3）： 264-265.