【摘 要】
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目的 了解本院老年感染患者(＞60岁)分离所得耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)的耐药性、耐药基因及患者的临床特征.方法 以2019年5月—12月本院CRKP感染老年患者为研究对象,分离所得CRKP均由基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)进行鉴定;微量肉汤稀释法进行敏感性测定;PCR技术检测碳青霉烯耐药基因;多位点序列分型(MLST)技术对其进行分型.结果 收集的30株CRKP主要来自痰液和重症
【机 构】
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绍兴文理学院附属医院(绍兴市立医院)检验科,浙江绍兴312000
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目的 了解本院老年感染患者(＞60岁)分离所得耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)的耐药性、耐药基因及患者的临床特征.方法 以2019年5月—12月本院CRKP感染老年患者为研究对象,分离所得CRKP均由基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)进行鉴定;微量肉汤稀释法进行敏感性测定;PCR技术检测碳青霉烯耐药基因;多位点序列分型(MLST)技术对其进行分型.结果 收集的30株CRKP主要来自痰液和重症医学科;对头孢菌素类和碳青霉烯类抗生素的耐药率为100.00％;有24株携带blaKPC,2株携带blaNDM,以ST11型为主;CRKP感染患者在低体质量、患有肿瘤、免疫功能低下、感染过产ESBL细菌及使用过超广谱抗生素方面具有较高比例.结论 本地区老年感染患者分离的CRKP具有较高耐药率,并以产KPC酶为主要耐药机制,本研究为临床预防及控制CRKP的传播及感染提供了依据.
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目的 研究新生儿同种免疫性血小板减少症(NAIT)患者血小板相关性抗体情况.方法 设计血小板同种抗体筛查方案,采用固相红细胞黏附实验方法进行抗体筛查,利用Luminex方法进行抗体鉴定,采用聚合酶链反应测序方法对1例患者及其家系进行CD36基因分析.结果 36例NAIT疑似患者的抗体筛查中,直接抗球蛋白试验阳性为33例.抗体确认实验共发现14例抗HLA抗体和1例抗CD36抗体.分析1例抗CD36抗体患者家系,发现母亲存在c.-132A＞C纯合突变,可引起母亲CD36表达缺陷;而患儿为c.-132A/C杂合
目的 为避免条索形超薄切片样本定位包埋时样本位置发生偏移,设计一种定位包埋模具,以提高样本定向包埋及其超薄切片的效率.方法 在硅胶包埋板凹槽的底部顶端中间位置切割深约1 mm截面为等腰三角形的竖槽或横槽.将完成树脂渗透的条索形样本放入槽中,然后进行包埋、聚合、半薄切片或超薄切片及染色,最后用光学显微镜及透射电子显微镜进行观察.结果 使用常规包埋板包埋的样本约25％出现了位移,使用定位包埋板包埋的样本未出现显著位移,与常规包埋板相比样本位移比例显著下降(P＜0.01).结论 设计了一种可用于条索形超薄切片样
目的 建立海水中16种有机氯农药的气相色谱-电子捕获检测器测定方法.方法 海水样品经液-液萃取、固相萃取净化、氮吹浓缩等前处理后利用GC-ECD进行分析测定,色谱系统采用DB-1701毛细管色谱柱(30 m×0.32 mm,0.25 μm);柱温为程序升温,初始温度100℃,以15℃/min升温至200℃,保持10 min,然后以10℃/min速率升至250℃,保持8 min;进样口温度260℃.结果 在0.75 μ,g/L～200 μg/L浓度内,16种有机氯农药的线性关系良好,相关系数为0.9991～
目的 建立吹扫捕集-气质联用测定饮用水中一氟三氯甲烷的方法.方法 以相同浓度下一氟三氯甲烷和氟代苯内标标准物质来测定,在不同实验条件下,优化吹扫时间、解吸温度、吹扫流速等吹扫捕集参数和色谱、质谱条件.吹扫流速为40 ml/min、吹扫时间为11 min、解吸温度为250℃、为最佳实验条件.在选定的实验条件下,饮用水中的一氟三氯甲烷经吹扫捕集吹脱出后,捕集阱吸附,再经热解吸将目标物进入气相色谱仪分离,质谱检测,以特征离子与内标离子峰面积比值定量.结果 在选定的仪器条件卞,饮用水中一氟三氯甲烷在0.2 μg/
目的 分析EDTA滴定法、火焰原子吸收光谱法和电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)3种方法测定水样的优缺点及适用条件.方法 分别采用滴定法、火焰原子吸收光谱法,ICP-MS对不同水源的10个水样进行对比测定.结果 3种方法的测定速度有明显差别,其中滴定法最耗时.原子吸收分光光度法和ICP-MS法用时较短,且仪器误差小.结论 滴定法受人为因素影响较大,不合适大量样品或多元素水样的检测.原子吸收分光光度法和ICP-MS均有良好的稳定性.
目的 分析研究16种β2-受体激动剂类化合物的电喷雾质谱裂解规律,为质谱鉴定提供参考.方法 采用超高效液相色谱-三重串联四极杆质谱联用仪,正离子检测模式下进行测定,对该类化合物的裂解规律进行研究.结果 通过对16种β2-受体激动剂的质谱裂解碎片峰解析比较,发现在正离子模式下,该类化合物易获得质子形成[M+H]+准分子离子峰,而后在碰撞室经碰撞诱导解离后产生脱水、脱异丙基(脱叔丁基)或者脱氨基的特征碎片峰,这与其母核结构的侧链具有仲胺取代基有关.结论 本次研究对16种β2-受体激动剂的特征碎片峰的裂解规律进
目的 高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS-MS)测定尿中可替宁的分析方法.方法 采用甲基叔丁基醚(MTBE)为萃取剂,在弱酸条件下萃取尿液中的可替宁.使用Zorbax Eclipse Plus C18(150 mm×3 mm,1.8μm)色谱柱,以0.1％甲酸水-色谱醇甲醇(含0.1％甲酸)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.4 ml/min,柱温为45℃.使用ESI源正离子扫描模式质谱检测.结果 在1 ng/ml ～2000 ng/ml浓度内,方法线性相关系数为0.9998.检出限为0.5 ng/ml
目的 利用高效液相色谱-电感耦合等离子体质谱(HPLC-ICP-MS)联用技术,建立土壤样品中亚砷酸根[As(Ⅲ)]、砷酸根[As(Ⅴ)]、一甲基砷(MMA)、二甲基砷(DMA)、砷甜菜碱(AsB)和砷胆碱(AsC)6种砷形态的分析方法.方法 样品以0.8 mol/L磷酸为提取液,常温超声辅助提取6 h后,采用Hamilton PRP-X100(4.1 mm×250 mm)阴离子交换色谱柱进行分离,以0.5 mmol/L碳酸铵+2％甲醇(pH=9.2)-50 mmol/L碳酸铵+8 mmol/L磷酸氢二氨
目的 建立快速检测牛肉源性成分的环介导等温扩增(LAMP)-核酸试纸条方法.方法 用直接加热煮沸方法提取鲜肉标本中的DNA;根据牛属特异性的16S基因序列片段设计引物和探针,优化扩增温度和扩增时间;结合核酸试纸条显色,将建立的快速检测方法与商品化的荧光定量PCR试剂盒比较.结果 LAMP检测方法的最佳反应条件为65℃30 min,5 min内通过扩增产物显色肉眼即可判断结果;具有高度特异性,只有牛肉标本出现特异性扩增;最低检测限为10 μg;与荧光PCR方法比较,两者检测结果一致.结论 环介导等温扩增-核
目的 建立人血浆样品中乌头碱的分散固相萃取-超快速液相色谱串联质谱分析方法.方法 样品经乙腈提取,用无水硫酸镁除水、净化.以乙腈和水为流动相,采用梯度洗脱方式在ACQUITY UPLC BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7 μm)色谱柱上进行分离,以电喷雾正离子模式进行质谱检测.结果 乌头碱在0.1μg/L ～ 60.0μg/L具有良好的线性关系(r＞0.999),方法的定量限为0.1μg/L,检出限为0.03μg/L,日内、日间精密度(以相对标准偏差表示)均＜6.0％,准确度(以回收率表示