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利用高速逆流色谱法,并选用V(庚烷):V(乙腈):V(乙酸乙酯)=5:5:1溶剂体系,成功地分离了混合植物甾醇标准品中的β-谷甾醇和菜油甾醇.经过HPLC检测,一次性分离可得到质量分数为97%的β-谷甾醇和质量分数为91%的菜油甾醇产品,收率分别可达56%和50%.该方法简便、重现性好,可作为高纯度β-谷甾醇和菜油甾醇标准品的制备分离方法.