文冠果的组织培养和快繁技术

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  一、植物名称
  文冠果(Xanthoceras Sorbifolia Bge)
  二、材料类别
  文冠果种胚和幼嫩叶片
  三、培养条件
  诱导芽分化和继代增值培养基:(1)WPM+6-BA0.5mg/L,(2)WPM+6-BA1.0mg/L,(3)WPM+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L,(4)WPM+6-BA1.0mg/L+NAA0.2;生根培养:(5)WPM+IBA0.5mg/L,(6)WPM+IBA0.8mg/L。每种培养基均附加3%蔗糖、0.57%琼脂、肌醇200mg/L、水解乳蛋白250mg/L,ph值5.8。培养温度25±2℃,每天光照16h,光照强度1600Lx。
  四、生长与分化情况
  1.芽的诱导
  分别取文冠果种胚和幼嫩叶片,流水冲洗干净,用75%酒精浸泡30s,然后用0.1%HgCl灭菌6min,再用无菌水洗5次后,种胚接种于培养基(4),种胚3d后开始膨大变绿,18d左右膨大部分长出许多绿色突起,再转接于培养基(3)中,14d左右从绿色突起处长出许多丛生芽。幼嫩叶片接种于培养基(3)中,15d左右叶片轻微愈伤化,重新转接于培养基(3)中,25d左右从主叶脉处分化出不定芽。
  2.继代增值
  切取分化的芽接种于培养基(3)中培养,25d左右长出少量的不定芽,个别植株发生轻微玻璃化。转接于培养基(2)中培养,不定芽比(3)中稍微大一些,增值速度比(3)中稍快,但不定芽发生依然较少,且轻微褐化。转接于培养基(1)中培养,不定芽叶色浓绿,增值速度明显比培养基(2)和(3)中的快很多,也能分化出大量的不定芽(图1)。平均25d左右转接一次,芽的增值率可达4~7倍。在转接过程中将生长健壮的不定芽接入生根培养基中,其余部分转接继代培养集中。
  
  图1 文冠果增殖培养图2 文冠果生根培养
  
  3.生根与移栽
  将分化健壮、良好的不定芽切下,接种于培养基(5)和(6)中,进行生根培养。10d后芽基部都可直接长出不定根,培养基(5)中不定根很细,且根数少,生根率较低;在培养基(6)中长出较多粗而长的不定根,且带有一定量的根毛(图2),生根率89%,30d左右便可移栽。当进一步提高生长素IBA浓度时,大部分形成鸡爪状根,伸长生长受到抑制。移栽时,不经过炼苗,直接取出生根苗,洗净根部附着的琼脂,栽种于经过消毒的珍珠岩中。移栽后覆盖塑料膜,第一周上部覆盖草帘,只有闪射光照射,一周后不断增加光照,并且每天揭膜通风一次,30d后可以完全去掉塑料膜。
  五、意义与进展
  文冠果又名木瓜,属无患子科文冠果属,落叶小乔木或灌木,高可达8m。种子繁殖,个体性状差异显著,影响产量,而嫁接繁殖成活率较低,因此对其优良品种采取组织培养快繁是目前最有效的繁殖方法。文冠果是中国特有的温带木本油料植物,在石油资源日益枯竭的今天,文冠果作为重要的生物能源树种,由于其耐干旱、耐瘠薄、适应性广的特性,无疑具有更大的发展潜力。 “本文中所涉及到的图表、公式、注解等请以PDF格式阅读”
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