【摘 要】
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目的 从噬菌体展示随机12肽库筛选人类白细胞抗原(HLA)-B·2704及B·2705重链拮抗肽并做初步鉴定.方法 用HLA-B*2704/B*2705重链胞外区蛋白分别筛选噬菌体展爪随机肽库,酶联
【机 构】
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军事医学科学院附属医院免疫学实验室国家生物医学分析中心免疫学实验室
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目的 从噬菌体展示随机12肽库筛选人类白细胞抗原(HLA)-B·2704及B·2705重链拮抗肽并做初步鉴定.方法 用HLA-B*2704/B*2705重链胞外区蛋白分别筛选噬菌体展爪随机肽库,酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴定阳性克隆,DNA测定确定氨基酸序列,免疫荧光和流式细胞术鉴 ,定噬菌体克隆分别与HLA-B*2704及B*2705细胞株结合的特异性.结果 经3轮筛选,获得12个HLA-B·2704拈抗肽,共有5种序列,分别为HTSFCSTHLCLI(×4),QHCSPTLCQIHR(×5),ARCTITL-CYLSN(×1),YGLCTDWYCHIT(×1),YPLCDAILCRLP(×1);10个B*2705拮抗肽共有4种序列,分别为:①SHCSPHWCALPF(×6);②HLCSNSLCLLPW(×2);③EPMCSWFWCTLP(×1);④WTCSPLLCTWGA(×1).比对分析表明,B*2704与B*2705拮抗肽的序列是基本一致的,均含有CS(T)TXXL(W)CXL表位.展示有B*2704拮抗肽的噬菌体克隆可与HLA-B*2704细胞株结合,阳性率为43.55%;而B*2705拈抗肽噬菌体克隆与HLA-B·2705细胞株的阳性结合率为45.69%.结论 筛选获得的HLA-B27拈抗肽的噬菌体克隆具有一定的亲和力,可与表达于细胞株表面的B*2704和B**2705分子特异性结合,而与正常B细胞不结合,因而表现出一定的结合特异性.
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