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目的
探讨高糖环境下来氟米特(A771726)对人足细胞Podocalyxin(PCX)、核因子(NF)-κB和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的影响及其机制。
方法在高糖环境下培养足细胞, Western印迹法检测不同时间点足细胞特征蛋白PCX表达的变化;再将足细胞分为正常糖组、来氟米特组、高糖组、高渗对照组进行培养,用Western印迹法检测各组足细胞PCX蛋白的表达。Western印迹法检测不同时间点高糖培养足细胞NF-κB p65及磷酸化NF-κB p65(P-NF-κBp65)活性;再将足细胞分为正常糖组、甘露醇高渗对照组、高糖组、来氟米特组和NF-κB阻断剂(PDTC)组,用Western印迹法检测各组足细胞MMP-9蛋白的表达。
结果在高糖环境下,足细胞特征蛋白PCX的表达随时间持续下降;来氟米特组PCX蛋白表达明显高于高糖组(0.46±0.04比0.13±0.03,P<0.05)。在高糖刺激足细胞在30 min时,NF-κB的活化开始,P-NF-κBp65蛋白表达上升,60 min达高峰,6 h后接近基础水平;而在同一时点NF-κB阻断剂PDTC组和来氟米特组足细胞MMP-9蛋白表达明显低于高糖组,差异均有统计学意义(0.71±0.01、0.64±0.03比1.64±0.03,均P<0.05)。
结论来氟米特(A771726)对高糖环境下的足细胞有保护作用,其机制可能是通过抑制NF-κB活化而减少足细胞表达MMP-9。