【摘 要】
：
目的 探讨应用大肠杆菌Klenow大片段同时补平及切平DNA 3’凹端或3’凸端的可行性。方法 以构建乙型肝水（乙肝）病毒S基因的真核表达载体为例，用Kpn I及Xhol I消解含乙肝病毒前S/
论文部分内容阅读
目的 探讨应用大肠杆菌Klenow大片段同时补平及切平DNA 3’凹端或3’凸端的可行性。方法 以构建乙型肝水（乙肝）病毒S基因的真核表达载体为例，用Kpn I及Xhol I消解含乙肝病毒前S/S基因的质粒，切除质粒中的前S区基因序列。通过Klenow大片段的核酸外切酶的活性切平质粒Kpn I切口的3’凸端，再利用其聚合酶活性补平Xhol I的3’凹端。处理后的质粒经连接酶作用而自身环化后，转化并筛选阳性克隆。结果 重组质粒获得了限制性内切酶分析的证实；对重组质粒的序列测定表明，Kpn I及Xhol I酶切端经Klenow大片段切(补)平并重新连接后其接续口端序列与预期一致。结论 对质粒作内部改建中，质粒两端分别为3’凸端及3’凹端时，可以同时利用Klenow大片段的两种酶活性将DNA末端修饰为平端，以便于使质粒自身环化。
其他文献
对生存质量的概念，及生存质量量表的若干问题，包括生存质量的研究内容、量表的质量测定及应用范围等进行 综述，并展望其发展趋势。
本文讨论了对于健康人群基本生理参数进行监测的重要意义,分析了无线生理参数监测系统的国内外发展概况及趋势。在系统总体设计之前,对系统进行了分析,介绍了系统的相关理论
土地整治绩效评价对规范与指导土地整治的实践活动,提高专项资金投资效益具有重要意义。该研究以黑龙江省土地整治试点项目为例,构建了黑龙江省土地整治项目绩效评价指标体系
随着全球环境破坏、资源短缺、人口爆炸等问题日益严重,要求企业顾及消费者整体与长远利益即社会利益的呼声越来越高。市场营销学界提出了一系列的新观念。如人类观念(Human
论文在借鉴国内外研究成果的基础上,对工程项目人力资源管理的内涵、特征进行了界定和表述。阐述了工程项目人力资源管理模式研究的目的和意义。在此基础上,围绕工程项目组织
歌剧创作中主要人物的形象塑造是展开戏剧、揭示内涵的核心手段,也是决定一部歌剧作品成功与否的重要标志之一。在普契尼的歌剧作品中,成功塑造了一系列女性人物形象,成为其
森林火灾是一种重要的生态因子,会引起其他生态因子的重新分配,具有调节和调控森林生态系统的结构和功能、维护某些物种生存的作用。该文对大兴安岭地区森林减灾效益作出评价
文章通过对粉煤灰性质及经济效益的论述,从内蒙古达拉特电厂粉煤灰排放的具体情况及粉煤灰的特性出发,结合当地经济发展的需要,分析了开展粉煤灰综合利用的途径,对其产生的经
竞业禁止是为了保护企业商业秘密而建立起来的以限制劳动者自由择业权为主要手段的一种制度。该制度由代理制度中的忠实义务演变而来,并随着代理制度适用范围的不断扩展而逐
聚乳酸是近年来可生物降解高分子聚合物研究的热点之一，作者对聚乳酸的合成及其影响因素、聚乳酸的理化性质、生物相容性、骨诱导作用以及不良反应等问题进行简要综述。