目的 观察自噬(autophagy)在心肺复苏(CPR)后Wistar大鼠脑损伤中的作用.方法 实验一:36只健康成年雄性Wistar大鼠通过体外交流电刺激诱发心室颤动(VF),VF (0)前和ROSC后1、2、4、8、12 h取大脑皮层观察beclin-1和LC3Ⅱ的表达.实验二:60只Wistar大鼠随机(随机数字法)分为对照组(control)、自噬激活剂雷帕霉素组(Rapamycine)和自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组(3-MA).VF前1h分别向腹腔内注入生理盐水或雷帕霉素1 mg/kg或3-甲基腺嘌呤30 mg/kg.ROSC后2、4h取大脑皮层,用电镜和Western blot方法观察神经元自噬的激活,免疫荧光观察LC3颗粒的形成;24、48、72 h进行NDS评分;72h后取大脑皮层行HE染色和TUNEL染色计数顶叶皮层存活神经元细胞数和凋亡神经元细胞数.beclin-1、LC3Ⅱ表达和神经元计数用单因素方差分析,NDS比较用秩合检验.结果 实验一中28只Wistar大鼠复苏成功.ROSC后2、4h自噬基因beclin-1和LC3Ⅱ的表达明显低于VF前(P＜0.05),而ROSC后8、12h的表达与VF前差异无统计学意义.Rapamycine组动物ROSC后2、4h大脑皮层beclin-1的表达和LC3Ⅱ的转换明显高于Control组和3-MA组,P＜0.05.ROSC后2、4 h Rapamycine组自噬泡数量明显多于Control组和3-MA组;ROSC后4 h Rapamycine组LC3颗粒数也明显多于Control组和3-MA组.ROSC后72 h Rapamycine组动物大脑皮层存活的神经元细胞数多于Control组和3-MA组(P＜0.05);凋亡神经元细胞数Rapamycine组少于Control组和3-MA组(P＜0.05).ROSC后24、48、72 h Rapamycine组的NDS评分优于control组和3-MA组(P＜0.05).结论 ROSC后早期大脑皮层神经元beclin-1和LC3-Ⅱ表达下降,通过雷帕霉素促进beclin-1和LC3-Ⅱ表达可以保护神经元细胞和改善神经功能。
激活自噬减轻心肺复苏后Wistar大鼠脑损伤
【摘 要】
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目的 观察自噬(autophagy)在心肺复苏(CPR)后Wistar大鼠脑损伤中的作用.方法 实验一:36只健康成年雄性Wistar大鼠通过体外交流电刺激诱发心室颤动(VF),VF (0)前和ROSC后1、2、4、8、12 h取大脑皮层观察beclin-1和LC3Ⅱ的表达.实验二:60只Wistar大鼠随机(随机数字法)分为对照组(control)、自噬激活剂雷帕霉素组(Rapamycine)和
【机 构】
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510080广州,中山大学附属第一医院急诊科,中山大学附属第三医院肾内科,510080广州,中山大学附属第一医院急诊科,510080广州,中山大学附属第一医院急诊科,510080广州,中山大学附属第一
【出 处】
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中华急诊医学杂志
【发表日期】
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2013年22期
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