屋尘螨变应原Derp9基因的克隆表达、纯化及反应原性鉴定

来源 :南昌大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yjddstevens

【摘要】

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目的克隆表达及纯化屋尘螨第九组变应原(Derp9)蛋白,并鉴定其反应原性。方法提取屋尘螨总RNA,通过RT-PCR克隆Der P9基因,并连接到pET-32a表达载体上,得到的重组质粒pET-32a-D

【作者】

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李平黄娜娜常可欣李诞杨礼腾刘志刚刘晓宇

【机构】

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深圳大学过敏反应与免疫学研究所,深圳大学第三附属医院呼吸科和变态反应科

【出处】

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南昌大学学报:医学版

【发表日期】

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2018年6期

【关键词】

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屋尘螨 Derp9 表达纯化反应原性 Dermatophagoides pteronyssinus Der p9 expression purificati

【基金项目】

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国家自然科学基金(31729002、81628001),广东省科技计划项目(2014B090901041、2016A020216029),深圳市孔雀团队项目(KQTD20170331145453160),呼吸疾病国家重点实验室开放基金(SKLRD2018ZJ001),广州市科学研究计划重点项目(201804020043),深圳市科技计划基础研究项目(JCYJ20160429171931438、JC

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目的克隆表达及纯化屋尘螨第九组变应原(Derp9)蛋白,并鉴定其反应原性。方法提取屋尘螨总RNA,通过RT-PCR克隆Der P9基因,并连接到pET-32a表达载体上,得到的重组质粒pET-32a-Derp9转化至E.ColiBL21(DE3),用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过镍离子亲和层析纯化目的蛋白;通过Western blotting等方法检测Derp9重组蛋白的反应原性。结果Derp9基因片段大小约为850bp,其基因片段与Gen Bank公布的Derp9基因(登录号为A

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