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【摘要】抗酸染色是病理特殊染色的一个难点，染色质量的好坏很大程度影响了病理医生能否做出正确的病理诊断，从而直接影响了临床治疗效果。为探讨如何提高抗酸染色阳性率，我们回顾性分析了我院近年来肉芽肿性炎症抗酸染色切片的结果，对抗酸染色技术进行一些改良，提高了抗酸染色的整体阳性率，提高了病理诊断的准确率。
【关键词】抗酸染色；薄切片；肉芽肿性炎症
【中图分类号】R-1 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2015）04-0207-01
抗酸染色技术是利用一些细菌细胞壁脂质含量高，菌体内有分枝菌酸，被着色后而不易洗脱的原理来检测该类细菌。抗酸染色阳性杆菌涉及诸多菌种，会导致以肉芽肿形成为主要特征的慢性增生性炎症，如结核、麻风等，临床主要用于检测以结核杆菌，临床上和流行病学中常用查见抗酸杆菌作为结核病诊断的依据[1]。目前抗酸染色是病理特殊染色的一个难点，染色质量的好坏很大程度影响了病理医生能否做出正确的病理诊断，从而直接影响了临床治疗效果。为我们在分析抗酸染色的特点后，对抗酸染色进行了一些改进，阳性率得到了明显提高，现将我们的做法介绍如下：
1.组织取材，常规10%福尔马林液固定、脱水、透明。
2.切片。切1-2μm的薄片，而常规抗酸染色切片厚度约为4μm。
3.烤片及脱蜡。常规抗酸染色对烤片及脱蜡没有特殊要求，烤片65℃，30分钟，两缸生物环保脱蜡液，各10分钟。在淋巴结及乳腺组织抗酸染色中，我们烤片时间为65℃，2小时，两缸生物环保脱蜡溶液脱蜡，各20分钟，这样组织切片透明度好，切片不容易脱片。
4.初染 用玻片夹夹持涂片标本，滴加石炭酸复红2-3滴，在火焰高处徐徐加热，切勿沸腾，出现蒸汽即暂时离开，若染液蒸发减少，应再加染液复染，加热3-5分钟，待标本冷却后用水冲洗。
5.脱色3%盐酸酒精脱色30秒-1分钟；用水冲洗。
6.复染用碱性美兰溶液复染30秒-1分钟，水洗，用吸水纸吸干后用镜下观察。
讨论
抗酸染色是一种组织化学显示分枝杆菌的一种常用方法，抗酸染色阳性的细菌，就是分枝杆菌属的细菌，包括结核性分枝杆菌、麻风分枝杆菌及非结核性分枝杆菌，广泛存在于自然界，如土壤、空气、动物体表及体液中，是条件致病菌。这类分枝杆菌菌体壁上含有不等量的脂质（蜡膜），不易着色。但是能与石炭酸碱性品红染液结合成复合物，这种复合物着染后即可抵抗酸的脱色作用。抗酸染色查找分枝杆菌的阳性率普遍偏低，对临床的治疗帮助不大。我们改良后的抗酸染色切片，组织透明度好，红色的抗酸杆菌与蓝色的背景对比明显，在经过三名高年资医生仔细阅片，抗酸染色阳性率显著提高，临床反馈这些病例在经过抗结核治疗后肿块明显缩小，为各种肉芽肿性炎症的治疗提供了依据。因此，规范操作抗酸染色技术，掌握技术环节重点，保证检测结果准确，对于肉芽肿性炎症，特别是结核病的诊断具有重要临床意义。
参考文献
[1]马玙，朱莉珍，潘毓萱.结核病[M].北京：人民卫生出版社，2009：100-104.
[2]秦云.抗酸桿菌检测的质量保证[J].哈尔滨医药，2011，31（5）：362-363.
[3]张楠，张敏，王红阳，等.支气管镜技术在肺结核病诊治中的应用进展[J].河北医药，2011，31（7）：1057-1059.
[4]赵雁林，姜广路.中国结核病防治规划[M].北京：中国协和医科大学出版社，2009：50.
[5]陈文文，张维，沈况敏，等.恒温水浴加热染色法检测结核分枝杆菌效果分析[J].中外医疗，2011，16（1）：72.
[6]杜建梅.温度对结核杆菌抗酸染色检出率的影响[J].青海医药杂志，2011，41（5）：52.
【关键词】抗酸染色；薄切片；肉芽肿性炎症
【中图分类号】R-1 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2015）04-0207-01
抗酸染色技术是利用一些细菌细胞壁脂质含量高，菌体内有分枝菌酸，被着色后而不易洗脱的原理来检测该类细菌。抗酸染色阳性杆菌涉及诸多菌种，会导致以肉芽肿形成为主要特征的慢性增生性炎症，如结核、麻风等，临床主要用于检测以结核杆菌，临床上和流行病学中常用查见抗酸杆菌作为结核病诊断的依据[1]。目前抗酸染色是病理特殊染色的一个难点，染色质量的好坏很大程度影响了病理医生能否做出正确的病理诊断，从而直接影响了临床治疗效果。为我们在分析抗酸染色的特点后，对抗酸染色进行了一些改进，阳性率得到了明显提高，现将我们的做法介绍如下：
1.组织取材，常规10%福尔马林液固定、脱水、透明。
2.切片。切1-2μm的薄片，而常规抗酸染色切片厚度约为4μm。
3.烤片及脱蜡。常规抗酸染色对烤片及脱蜡没有特殊要求，烤片65℃，30分钟，两缸生物环保脱蜡液，各10分钟。在淋巴结及乳腺组织抗酸染色中，我们烤片时间为65℃，2小时，两缸生物环保脱蜡溶液脱蜡，各20分钟，这样组织切片透明度好，切片不容易脱片。
4.初染 用玻片夹夹持涂片标本，滴加石炭酸复红2-3滴，在火焰高处徐徐加热，切勿沸腾，出现蒸汽即暂时离开，若染液蒸发减少，应再加染液复染，加热3-5分钟，待标本冷却后用水冲洗。
5.脱色3%盐酸酒精脱色30秒-1分钟；用水冲洗。
6.复染用碱性美兰溶液复染30秒-1分钟，水洗，用吸水纸吸干后用镜下观察。
讨论
抗酸染色是一种组织化学显示分枝杆菌的一种常用方法，抗酸染色阳性的细菌，就是分枝杆菌属的细菌，包括结核性分枝杆菌、麻风分枝杆菌及非结核性分枝杆菌，广泛存在于自然界，如土壤、空气、动物体表及体液中，是条件致病菌。这类分枝杆菌菌体壁上含有不等量的脂质（蜡膜），不易着色。但是能与石炭酸碱性品红染液结合成复合物，这种复合物着染后即可抵抗酸的脱色作用。抗酸染色查找分枝杆菌的阳性率普遍偏低，对临床的治疗帮助不大。我们改良后的抗酸染色切片，组织透明度好，红色的抗酸杆菌与蓝色的背景对比明显，在经过三名高年资医生仔细阅片，抗酸染色阳性率显著提高，临床反馈这些病例在经过抗结核治疗后肿块明显缩小，为各种肉芽肿性炎症的治疗提供了依据。因此，规范操作抗酸染色技术，掌握技术环节重点，保证检测结果准确，对于肉芽肿性炎症，特别是结核病的诊断具有重要临床意义。
参考文献
[1]马玙，朱莉珍，潘毓萱.结核病[M].北京：人民卫生出版社，2009：100-104.
[2]秦云.抗酸桿菌检测的质量保证[J].哈尔滨医药，2011，31（5）：362-363.
[3]张楠，张敏，王红阳，等.支气管镜技术在肺结核病诊治中的应用进展[J].河北医药，2011，31（7）：1057-1059.
[4]赵雁林，姜广路.中国结核病防治规划[M].北京：中国协和医科大学出版社，2009：50.
[5]陈文文，张维，沈况敏，等.恒温水浴加热染色法检测结核分枝杆菌效果分析[J].中外医疗，2011，16（1）：72.
[6]杜建梅.温度对结核杆菌抗酸染色检出率的影响[J].青海医药杂志，2011，41（5）：52.