坏死梭杆菌白细胞毒素部分融合基因的真核表达及生物学特性研究

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：lrg1169

【摘要】

：

为了解坏死梭杆菌白细胞毒素的致病机制，本研究将实验室前期构建的坏死梭杆菌白细胞毒素基因部分融合基因的真核表达质粒（pPIC9K-bsbse-gas-sh）转化毕赤酵母KM71H细胞，1％甲醇诱导

【作者】

：

冯二凯刘晓颖佟盼盼任飞尹茉莉于凯陈立

【机构】

：

吉林特研生物技术有限责任公司,中国农业科学院特产研究所,吉林农业大学

【出处】

：

中国预防兽医学报

【发表日期】

：

2016年7期

【关键词】

：

坏死梭杆菌白细胞毒素融合基因真核表达

【基金项目】

：

吉林省科技攻关计划(20150204073NY);吉林市科技发展计划(201262509)

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为了解坏死梭杆菌白细胞毒素的致病机制，本研究将实验室前期构建的坏死梭杆菌白细胞毒素基因部分融合基因的真核表达质粒（pPIC9K-bsbse-gas-sh）转化毕赤酵母KM71H细胞，1％甲醇诱导其表达目的蛋白；SDS-PAGE结果显示，甲醇诱导3d后，重组BSBSE-GAS-SH蛋白以分泌形式表达于培养物上清液中，分子量约为117．9ku；western blot表明重组蛋白能够与抗BSBSE抗血清发生反应，具有良好的反应原性；细胞毒性试验表明重组蛋白对小鼠肝细胞和巨噬细胞均具有细胞毒性作用，并且具有剂量

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