【摘 要】
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目的以细胞有丝分裂阻滞剂Nocodazole为诱导物,诱导白血病细胞系 HL-60细胞凋亡,并进行形态学和生物化学指标的检测. 方法首先,观察1 nmo l*L-1～10 μmol*L-1递增浓度的Nocoda
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目的以细胞有丝分裂阻滞剂Nocodazole为诱导物,诱导白血病细胞系 HL-60细胞凋亡,并进行形态学和生物化学指标的检测. 方法首先,观察1 nmo l*L-1～10 μmol*L-1递增浓度的Nocodazole对HL-60细胞的作用,然后选取浓度500 nmol*L-1诱导凋亡,通过HE染色、荧光染色、DNA片段化(DNA fragmentat ion)及流式细胞仪分析研究其凋亡的特征. 结果 5 nmol*L-1～ 1 0 μmol*L-1的Nocodazole都可以诱导HL-60细胞的凋亡. 在500 nmol*L-1 的Nocodazole作用下,HE染色、荧光染色显示从6 h开始即出现胞质嗜碱性增强、细胞核固缩断裂、凋亡小体形成等凋亡的形态学特征性改变. 基因组DNA电泳检测显示从8 h开始出现微弱的梯状DNA. 流式细胞仪检测了不同时间点的细胞周期显示了G2期阻滞,未能检测到亚二倍体峰. 结论我们用Nocodazole不仅诱导了典型的白血病细胞凋亡,而且在G2/M期阻滞与凋亡之间建立了联系,可用于凋亡机制或细胞周期调控与凋亡关系的研究.
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