【摘 要】
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根据已发表的PrP^c蛋白基因序列,设计合成一对引物,并在2个引物的两端分别加入Bam HI和Nde Ⅰ酶切位点。以从中国黄牛肝脏中提取的基因组DNA为模板,经PCR扩增出一约640bp的目的
【机 构】
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农业部动物检疫所疯年病研究中心,农业部动物检疫所全国疯牛病检测中心
【基金项目】
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农业部948项目,,农业部疯牛病监测项目,,青岛市科技发展计划项目 (2001-2)资助
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根据已发表的PrP^c蛋白基因序列,设计合成一对引物,并在2个引物的两端分别加入Bam HI和Nde Ⅰ酶切位点。以从中国黄牛肝脏中提取的基因组DNA为模板,经PCR扩增出一约640bp的目的基因片段,将此基因克隆于pET11a载体,构建了PrP^c蛋白基因重组质粒b-pET11a-PrP^c,转化DH-5α并进行序列测定。同源性分析表明:中国黄牛PrP^c成熟蛋白基因与目前国外发表牛的成熟蛋白PrP^c基因相比,有较大差异,发现了一个新的NdeⅠ酶切位点;推导的氨基酸序列有4个氨基酸差异,缺少一个8氨基
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