【摘 要】
:
目的:构建一种可用于评价人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived stem cells,hASCs)成骨向分化的荧光素酶报告系统,以期能够快捷、特异且定量的检测出细胞在体外的成骨向分化
【机 构】
:
北京大学口腔医学院·口腔医院综合二科,北京 100081北京大学口腔医学院·口腔医院修复科,北京 100081;
论文部分内容阅读
目的:构建一种可用于评价人脂肪间充质干细胞(human adipose-derived stem cells,hASCs)成骨向分化的荧光素酶报告系统,以期能够快捷、特异且定量的检测出细胞在体外的成骨向分化情况,并且使将来活体监测小型实验动物外源移植细胞的成骨分化成为可能。方法:将骨钙素(osteocalsin,OC)基因的启动子克隆到荧光素酶lu-ciferase报告基因的上游,构建pLVX-OCpro-Luc-Puro载体,进行慢病毒包装后感染人脂肪间充质干细胞,嘌呤霉素(puromycin)筛选阳性克隆,获得稳定整合OCpro-Luc-Puro的细胞株,将该细胞在成骨诱导培养基中培养的第7和14天,观察其在成骨诱导环境下分化的情况。在成骨诱导培养的第7和14天检测荧光素酶的活性,同时进行茜素红(Alizarin red S)染色定量及成骨相关基因表达水平的检测,通过比较验证该荧光素酶报告系统用于成骨评价的可行性。结果:成功构建pLVX-OCpro-Luc-Puro 载体获得稳定整合报告基因的 hASCs 细胞株。在 OCpro-Luc-Puro-hASCs成骨诱导的第7和14天,茜素红钙化结节染色结果均为阳性,且第14天的染色及定量结果明显强于第7天。OC、Runx2及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)基因的mRNA水平在成骨分化刺激下,其表达水平逐渐上升,同时,荧光素酶被激活,且荧光素酶的活性在第14天明显强于第7天,即荧光素酶表达的趋势与茜素红染色定量及成骨相关基因表达水平一致。结论:成功构建了一种可用于评价成骨向分化的荧光素酶报告系统,并通过与传统的检测成骨向分化方法(茜素红染色定量、成骨相关基因表达)对比,验证了该系统的有效性。
其他文献
众所周知,《独立评论》是以胡适为代表的一流文化精英所创办、发行全国各地乃至欧、美、日、德等国家和地区的刊物,是在中国现代史上产生过重要影响的刊物之一。然而,对于这本刊物,世人知道的却只有胡适,而对黎昔非与胡适以及《独立评论》的关系却知之甚少。黎昔非于1932年4月应胡适之邀出任《独立评论》的经理人,直至1937年7月25日最后一期《独立评论》出版之后,于7月27日离开北平,与《独立评论》相始终,前
文章根据房屋墙体结构的特点,详细分析了房屋墙体粉刷工程开裂的原因和规律,提出了在不同条件下预防房屋墙体粉刷工程开裂的具体而切实可行的措施。
According to the chara
当前,随着中国经济的飞速发展和经济实力的日益增强,人民币在国际市场上面临严峻的升值压力,人民币升值必然对我国对外贸易的发展产生一定的影响.在了解人民币升值的背景、原
怎样能让学生乐写作文呢?关键在于激发学生的习作兴趣.培养作文兴趣的巧妙之处,就在于教师要从学生的实际出发,根据不同年龄阶段儿童的身心发展的特点,尊重他们的好奇心,尊重
摘要:随着新课改的不断进行,对初中语文教学的教学方式有了更高的要求,为了符合新课改要求,实行了小组合作的教学方式,这样必然会使得语文教学的成效出众。为此,初中的语文教师必须对分组合作的教学模式进行研究,并制定出相应的学习策略,最后将其应用到初中的语文教学中,提高学生们的学习兴趣和学习成绩。 关键词:初中语文;分组合作;教学效率 一、 引言 通过对语文教学的模式改进,通过小组合作的形式进行教
摘要:民族团结教育是国民教育的重要组成部分,也是增进民族和睦、社会和谐的重要培养途径和手段。云南省昆明市金星社区的民族团结教育堪称是全国民族团结教育的一个缩影,它不仅体现着多民族社区的内涵与外延,而且将创新性蕴含在实践当中。因此,通过总结金星社区在创建民族团结进步示范社区方面的经验与教训,对如何构建民族团结和谐社区提出相应的思考。 关键词:金星社区;民族团结教育;民族关系 随着90年代以来城市
对青海野生大黄茶营养成分进行了分析,结果表明:野生大黄茶中含有蛋白质、脂肪、维生素C、胡萝卜素等营养物质,其中维生素C和胡萝卜素含量丰富,分别达到47.97mg/100g和0.41mg
目的:探讨手法整复硬纸夹板外固定治疗跟骨骨折的疗效.方法:对本院患者进行分组对照研究(观察组和对照组各52例),观察两组患者的治疗恢复情况.结果:与接受传统手法复位固定治
这些信,有的写得很优美,有的写得很平凡,有的写得很绝望.但这些都是他们某时某刻的真实情感和希望与亲人分享的经历.战争,是战争让他们永远也不能打开想打开的圣诞礼物、永远
2008年的金融危机导致欧美国家银行业损失惨重,这就催生了在2010年9月12日世界主要国家中央银行达成一致意见的《巴塞尔协议Ⅲ》。逆周期资本监管在中国实行不仅可以平滑经济