【摘 要】
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目的研究显示Sirtuin1(Sirt1)可通过去乙酰化酶活性调控L脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)病理过程，进而改善临床急诊脓毒血症患者的预后。通过数据库检索显示microRNA-211(miR-211)与Sirt1具有靶向匹配，然而其生物学关联意义尚无数据。本研究旨在探讨miR-211与Sirt1间的关联，以及它们是否参与LPS加重缺氧对心肌细胞损伤作用。方法原代培养大
【机 构】
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310009 杭州，浙江大学医学院附属第二医院临床研究中心,310009 杭州，浙江大学医学院附属第二医院心血管重点诊治实验室,310009 杭州，浙江大学医学院附属第二医院心血管重点诊治实验室,
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目的研究显示Sirtuin1(Sirt1)可通过去乙酰化酶活性调控L脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)病理过程，进而改善临床急诊脓毒血症患者的预后。通过数据库检索显示microRNA-211(miR-211)与Sirt1具有靶向匹配，然而其生物学关联意义尚无数据。本研究旨在探讨miR-211与Sirt1间的关联，以及它们是否参与LPS加重缺氧对心肌细胞损伤作用。
方法原代培养大鼠(SD)乳鼠心肌细胞，应用qRT-PCR法检测LPS处理4 h后对大鼠乳鼠心肌细胞(neonatal nat cardiomyocytes，NRC)与H9c2心肌细胞中miR-211表达的变化，用Western blot法检测LPS处理后对NRC与H9c2心肌细胞中Sirt1蛋白表达的影响；同时应用CCK8法评价LPS对心肌细胞H9c2的细胞增殖情况；以及TUNEL法定量检测NRC与H9c2心肌细胞凋亡活性的影响。
结果与对照组相比，20 μg/mL、40 μg/mL浓度的LPS处理4 h后，H9c2心肌细胞在24～72 h时间段的增殖能力没有发生改变。然而，LPS预处理后NRC与H9c2在缺氧条件下细胞凋亡明显增加(较LPS未处理NRC与H9c2组凋亡率增加均超过了100%，P<0.05)；同时LPS处理后NRC与H9c2细胞中miR-211表达显著上调，且伴随其靶蛋白Sirt1表达明显下降(P分别<0.05)。
结论LPS可以增加缺氧诱导的心肌细胞凋亡，这与LPS通过上调miR-211水平进而抑制Sirt1表达这一作用机制密切相关。
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