293包装细胞产生重组逆转录病毒的基因转染研究

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目的:如何提高重组逆转录病毒的滴度和基因转染率,是目前需要研究的问题。方法:目的基因连接到病毒载体形成重组子;病毒载体质粒转入包装细胞293,产生无复制能力的病毒颗粒;用病毒感染NIH3T3细胞,测定病毒的滴度;将携带有目的基因的病毒颗粒转染靶细胞,绿色荧光蛋白(GFP)为转染阳性细胞的标记物,FACS分离阳性细胞;Western blot检测目的基因表达。结果:用包装细胞293产生的病毒颗粒,其滴度高达3×10^9;用携带目的基因的病毒转染悬浮细胞UT7,转染率为60%,转染贴壁细胞MDA-M
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