【摘 要】
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目的 本研究拟通过人群及动物模型探讨中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)在肺内源性急性呼吸窘迫综合征(ARDS)中的作用.方法 收集21例肺内源性ARDS患者(ARDS组),同期收治21例普通肺
【机 构】
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214023 江苏 无锡,南京医科大学附属无锡人民医院重症医学科2014023 江苏 无锡,南京医科大学附属无锡市儿童医院儿科实验室;南京医科大学附属无锡市儿童医院呼吸科;
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目的 本研究拟通过人群及动物模型探讨中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)在肺内源性急性呼吸窘迫综合征(ARDS)中的作用.方法 收集21例肺内源性ARDS患者(ARDS组),同期收治21例普通肺部感染患者(非ARDS组),检测外周血浆游离DNA(cf-DNA)含量并进行比较分析,了解NETs的总量有无区别;分离两组患者外周血中性粒细胞(PMNs),使用相同浓度(50 ng/mL)的佛波醇-12-肉豆蔻酯-13-乙酸(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)进行刺激,评估NETs产生的比例,了解PMNs功能有无变化;采用ARDS组及非ARDS组的肺泡灌洗液(BALF)与正常人PMNs进行共培养,评估NETs产生的比例,了解ARDS组肺部微环境有无异常.以内毒素(LPS,6 mg/kg)经鼻气管滴注法,建立ARDS动物模型,造模后24 h取肺组织,进行苏木素-伊红(HE)染色和免疫组化,在动物模型验证NETs在ARDS发病中的作用.结果 ARDS组cf-DNA含量明显高于非ARDS组[(639.11±291.16)ng/mL vs.(169.29±194.98)ng/mL,P=0.000].在ARDS动物模型中,肺组织NETs的表达同样较对照组增加.两组患者外周血提取的PMNs在使用50 ng/mL PMA刺激3 h后,ARDS组产生NETs的比例高于非ARDS组(78.16％vs.19.7％,P=0.000).正常健康人来源的PMN在与BALF共培养后,ARDS-BALF刺激PMNs产生NETs的比例高于非ARDS-NETS(81.4％vs.29.7％,P=0.000).结论 NETs的异常增多在肺内源性ARDS的发病中起着作用,ARDS患者PMNs功能异常及肺内微环境紊乱可能是引起NETs异常增多的原因.
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