【摘 要】
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目的:通过构建体内去卵巢小鼠骨质疏松模型和体外骨疏康颗粒含药血清诱导破骨细胞分化和凋亡模型,明确骨疏康颗粒诱导破骨细胞凋亡的作用,为阐明骨疏康颗粒治疗绝经后骨质疏松症提供新的作用机制。方法:120只3月龄雌性C57BL/6小鼠随机选择20只行假手术造模(Con)。其余100只实施去卵巢(OVX)手术,造模1周内随机分为5组,每组20只:OVX(0.9%氯化钠溶液)、CAL(钙尔奇D)、GSKL(骨
【基金项目】
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国家自然科学基金重点项目(No.81730107);国家自然科学基金面上项目(No.81673991);国家自然科学基金青年科学基金项目(No.81804116); 教育部创新团队计划项目(No.IRT1270); 科技部重点领域创新团队计划项目(No.2015RA4002); 国家重点研发计划项
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目的:通过构建体内去卵巢小鼠骨质疏松模型和体外骨疏康颗粒含药血清诱导破骨细胞分化和凋亡模型,明确骨疏康颗粒诱导破骨细胞凋亡的作用,为阐明骨疏康颗粒治疗绝经后骨质疏松症提供新的作用机制。方法:120只3月龄雌性C57BL/6小鼠随机选择20只行假手术造模(Con)。其余100只实施去卵巢(OVX)手术,造模1周内随机分为5组,每组20只:OVX(0.9%氯化钠溶液)、CAL(钙尔奇D)、GSKL(骨疏康颗粒2g·kg-1·d-1))、GSKM(骨疏康颗粒4g·kg-1·d-1)、GSKH(骨疏康颗粒8g·kg-1·d-1),连续灌胃3个月后收取小鼠腰椎(L3~L5),进行抗酒石酸盐酸性磷酸酶(TRAP)检测,观察其对破骨细胞数量的影响;同时采用TUNEL和TRAP双染法,观察破骨细胞的凋亡情况。体外实验部分,25只2月龄SD大鼠随机分为5组:生理盐水组(Con)、钙尔奇组(CAL)、GSKL、GSKM和GSKH,每组5只。灌胃完成后制备含药血清。取材C57BL/6小鼠单核巨噬细胞(BMMs)诱导破骨细胞的分化(4d),然后加入骨疏康颗粒制备的含药血清(5%),继续诱导2d后进行TRAP染色,观察含药血清对破骨细胞凋亡的影响。结果:体内研究发现,与对照组比较,OVX组小鼠破骨细胞的数量显著增多(P<0.05),骨疏康颗粒干预组小鼠破骨细胞数量显著下降(P<0.05)。TRAP和TUNEL双染色显示骨疏康颗粒促进小鼠体内破骨细胞的凋亡(P<0.05)。体外研究发现骨疏康颗粒含药血清能够诱导BMMs来源的破骨细胞的凋亡(P<0.05)。结论:骨疏康颗粒能够促进体内和体外破骨细胞凋亡,从而降低破骨细胞的骨吸收,延缓骨丢失和治疗骨质疏松症。
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