过氧化氢刺激COV434细胞建立体外氧化应激模型

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目的:通过使用过氧化氢在体外刺激COV434细胞,建立人卵巢颗粒细胞氧化应激模型并探讨其条件.方法:用不同H2O2浓度梯度处理COV434细胞2h、4h、6h、12h、24h后,用CCK-8检测法测定细胞增殖情况,试剂盒检测细胞上清液中活性氧族(ROS)、乳酸脱氢酶(LDH)、雌二醇及孕酮含量,并用免疫组化方法测定caspase-3水平,确定建模的最佳条件.结果:随着H2O2的浓度增高和作用时间增加,细胞增殖率呈下降趋势.0.4~0.6mmol/L浓度H2O2处理2h后细胞增值率下降明显,ROS、caspase-3上升最明显.细胞上清液中雌二醇和孕酮含量随着H2O2的浓度增高和作用时间增加呈下降趋势,LDH含量呈上升趋势.结论:H2O2可以诱导人卵巢颗粒细胞氧化损伤建立氧化应激模型,最合适的浓度为0.4~0.6mmol/L,作用时间为2h.
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