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摘要 目的：探讨针刀松解腘绳肌对膝骨性关节炎兔膝周肌群表面张力的影响。方法：将28只实验兔随机分为空白组，模型组，电针组及针刀组，每组7只，采用左后肢伸直位造模法制动8周，空白组及模型组随机挑选1只进行光镜观察，以验证模型是否成功，造模成功后，针刀组及电针组进行干预，共3周。然后将软组织张力计置于股二头肌、半腱半膜肌、股直肌、腓肠肌的肌腹与肌肉肌腱移行处分别测量力-位移值。结果：与空白组比较，模型组各点均有降低趋势，除股二头肌点外，其他点差异均有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较，电针组各点出现升高趋势，股二头肌与半腱半膜肌的肌肉肌腱移行处差异有统计学意义（P<0.05）。针刀组各点均有升高，除腓肠肌点（肌肉肌腱移行处）外，其他点差异均有统计学意义（P<0.05）。与电针组比较，针刀组各点均有升高，除股二头肌点（肌肉肌腱移行处）外，其他点差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：针刀松解腘绳肌可以有效降低膝周肌群表面张力。
关键词 针刀;腘绳肌;膝骨性关节炎;膝周肌群;肌张力
Abstract Objective：To investigate the effect of acupotomy loosening hamstring method on tissue tension of knee muscles of rabbits with knee osteoarthritis muscle. Methods：Twenty-eight experimental rabbits were randomly divided into 4 groups：electro-acupuncture therapy group， acupotomy therapy group， model group and blank group， with 7 rabbits per group. After eight weeks of left hind limb extension position modeling method， 1 rat in the blank group and model group were randomly selected for light microscope observation to verify the success of the modeling. After successfully modeling， electro-acupuncture therapy group and acupotomy therapy group were intervened for 3 weeks. Then， the soft tissue tension meter was placed on the muscular abdomen and the muscular tendon transition of the biceps femoris， semitendinosus semimembranosus， rectus femoris， and gastrocnemius muscles， and the force-displacement values was measured respectively. Results：Compared with the blank group， all points in the model group had a decreasing trend， except for the biceps femoris points， the other points had statistical significance （P<0.05）. Compared with the model group， the electro-acupuncture group showed an increasing trend in each point， and the muscular tendon transition of the biceps femoris and semitendinosus semimembranosus was statistically significant （P<0.05）. All points in the acupotomy group were increased， except for the gastrocnemius point （the muscular tendon transition）， other points were statistically significant （P<0.05）. Compared with the electro-acupuncture group， all points in the acupotomy group were increased， except for the biceps femoris （he muscular tendon transition），other points were statistically significant （P<0.05）. Conclusion：acupomoty release hamstring muscle method can effectively reduce the surface tension of the knee muscles.
Keywords Acupotomy therapy; Hamstring; Knee osteoarthritis; Knee muscle group; Muscle tension
中圖分类号：R245文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2020.12.006 骨关节炎（Osteoarthritis，OA）是以关节退行性改变为主要表现的疾病，其中膝关节的发病率为8.1%，在骨关节炎的发病率中位于首位[1]。膝骨性关节炎（Knee Osteoarthritis，KOA）主要以膝关节疼痛、僵硬为主要表现，后期可能出现关节畸形、功能障碍等，严重影响患者的生命质量[2]。KOA的患者通常出现软组织张力升高的改变，表现为肌肉、韧带、肌腱等软组织局部疼痛、挛缩及膝关节屈伸不利等[3]。但经针刀松解法治疗后患者软组织张力及疼痛感明显降低。故针刀松解法可以有效地减张减压，降低软组织张力，恢复膝关节的生物力学平衡，达到治疗疾病的目的，临床效果确切[4]。膝关节的稳定主要依靠股四头肌来维持，故以往研究侧重于股四头肌与KOA之间的联系，发现股四头肌与KOA的发生、发展关系密切，干预股四头肌可以改善症状，扩大关节活动度从而治疗KOA[5]。但对屈肌肌群研究甚少，屈肌肌群在维持关节稳定性方面与伸肌肌群同样重要，在此处进行治疗可以有效地改善膝关节功能状态，恢复其力学平衡，进而缓解疼痛[6-7]。故本实验以KOA兔为研究对象，探讨针刀松解腘绳肌对膝周肌群表面张力的影响。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物 新西兰雄兔28只（SCXK京2018-0100，北京科宇动物养殖中心），饲养于北京中医药大學良乡大动物房，体质量3.0～3.5 kg每组兔均单笼饲养，标准饲料，自由摄食饮（22±2）℃，湿度40%～60%左右，实验室定期采用紫外线消毒。
1.1.2 试剂与仪器 肌肉缓冲液（南京赛弘瑞生物科技有限公司，批号：3-4612）;4%多聚甲醛（北京化学试剂研究所，批号：P1110）;二甲苯（北京北化精细化学品有限责任公司，批号：2650-17-1）;酒精（北京贞玉民生药业有限公司，批号：B152440P）;1%盐酸（北京华夏蓝筹生物科技有限公司，批号：B62360）;石蜡（北京化学试剂公司，批号：YS1374）;伊红（北京凯瑞基生物科技有限公司，批号：12854）;苏木素（北京百诺威生物科技有限公司，批号：CY13470）;树脂绷带（珠海丽珠医用生物材料有限公司，批号：1560006）;医用高分子固定绷带（苏州可耐特医疗科技有限公司，批号：130101）;华友针刀（北京卓越华友医疗器械有限公司，批号：180602）;肌张力仪（天津明通世纪科技有限公司与中国中医科学院生物力学实验室共同研制生产的M-tone软组织张力仪及测试分析系统，型号：MT-JZL-Ⅲ型）;穴位刺激仪（北京华为产业开发公司，型号：LH202H）;分体包埋机（徕卡公司，德国，型号：EG1150）;切片机（徕卡公司，德国，型号：RM2245）;显微镜（奥林巴斯公司，日本，型号：BX53）;脱水机（樱花科技有限公司，日本，型号：Tissue-TEK VIP6）;捞片仪（徕卡公司，德国，型号：HI1210）;烤片仪（徕卡公司，德国，型号：HI1220）。
1.2 方法
1.2.1 分组与模型制备 将新西兰雄兔随机分为4组：空白组、模型组、电针组、针刀组。每组兔均单笼饲养，标准饲料，自由摄食饮水，室温（22±2）℃，湿度40%～60%左右，实验室定期采用紫外线消毒。造模前将动物禁食10～16 h，然后采用改良后的Videman法左后肢伸直位法造模，将3%戊巴比妥钠溶液耳缘静脉注射麻醉，剂量为30 mg/kg，牵拉其左后肢使其处于完全伸直位，然后将左后肢腹股沟至踝关节区域备皮，用树脂绷带固定其左后肢腹股沟到足踝处，使左后肢处于伸直位，注意足趾处留出位置以观察血流情况，防止出现血流不畅导致肢体坏死的情况用透明胶带将树脂绷带外缘封好，以防兔撕咬破坏，共制动8周。
1.2.2 干预方法 各组干预从拆除树脂绷带1周后开始。1）空白组：不作任何处理，每天正常抓取、捆绑固定。2）模型组：确定造模成功后，每天正常抓取、捆绑固定，不做任何处理。3）电针组：造模成功1周后开始进行治疗，穴位选择：曲泉、委阳、内膝眼和外膝眼。操作方法：将兔固定后，常规针刺，将曲泉与委阳，内膝眼与外膝眼用电针仪分别连接。进行频率2/100 Hz，强度3 mA的疏密波刺激，每次刺激时间20 min左右，2 d治疗1次，共治疗3周。4）针刀组：造模成功1周后，先用龙胆紫将穴位处进行标记，然后常规备皮、消毒、进针，松解2～3下左右出针，用干棉球按压片刻，防止止血。具体操作方法：1）半腱肌、半膜肌肌腱止点进针点操作：术者左手拇指用力按压穴位处，使软组织紧紧贴于骨面上，右手持针刀，刀刃平行于肌腱，刀体垂直于皮肤，紧贴左手按压处刺入，然后松解2～3刀后出针，用干棉球按压片刻防止止血。2）股二头肌肌腱止点进针点操作：同上。3）条索结节点进针点操作：同上。治疗15 min/次，1次/周，共3周。
1.2.3 检测指标与方法 1）HE染色：为验证造模是否成功，在造模结束后的第1天，从空白组及模型组各随机抽出1只兔，采用麻醉过量法将动物立即处死，将其关节腔完全暴露，切断与股骨连接的韧带、半月板以及其他组织，暴露股骨远端软骨，用咬骨钳迅速取下1 cm×1 cm的软骨标本，以0.9%NACL溶液将组织冲洗干净，然后将其固定在4%多聚甲醛溶液72 h。然后将其放入EDTA脱钙液进行脱钙处理，脱水、透明、石蜡包埋，切片机切片（切片6 μm），用二甲苯和梯度酒精脱蜡复水，用苏木素-伊红进行HE染色，然后对样本进行光镜观察，用OLYMPUSBX-53生物显微镜观察损伤部位软骨组织的结构、细胞数量以及潮线的完整性。2）力-位移值：于治疗1周后测量200 g压力下的力-位移值，将家兔仰卧位固定于测试台上，根据上述流程测试肌腹处及肌肉肌腱移行处各点（股二头肌、半腱半膜肌、腓肠肌、股直肌）的力-位移值。JZL-Ⅲ型肌张力仪由数据采集器、传感器及软组织张力分析系统组成。操作流程：首先将数据采集器连接到计算机上固定的USB接口，然后打开软组织张力分析系统的软件，启动程序后，将传感器悬空，点击“零点测试”按钮，程序会显示力、零点位移曲线，将之调到合适范围，然后点击“输入系数”按钮，输入合适的力、位移系数后。点击“开始测试”按钮，再输入文件名保存后即可开始测试。测试过程中，测试者右手握住传感器外壳，垂直对准测试部位，均匀下压2～3 s，放松时均匀放松2～3 s即可。总测试时间为6 s左右，测试完毕后，点击“显示数据图”按钮，即可查看数据，点击“结果分析”按钮，即可查看力-位移曲线。力-位移值与软组织张力呈反比，力-位移值越大，说明软组织张力越小，力-位移值越小，说明软组织张力越大。重复测试3次，取其平均值，为避免人为因素影响，所有测试均有同一测试者完成。空白及模型组测量方法同上。 1.3 统计学方法 采用SAS8.2统计软件进行数据分析，如符合正态分布，则采用单因素方差分析，如不符合正态分布，则采用非参数检验。数据表示均采用均值±标准差（±s）的方式。以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 HE染色 1）正常组兔由上至下可见表浅层、移行层、辐射层和钙化层四层结构，层次分明，结构完整。潮线清晰完整，细胞未出现簇集现象，排列均匀，无血管翳生成。见图1。2）模型组兔膝关节软骨层次难以分清，潮线扭曲断裂甚至消失，在浅层软骨出现了分层剥脱剥脱现象，出现细胞簇集现象。见图2。
2.2 力-位移值
2.2.1 股二头肌 1）肌腹处力-位移值：与空白组比较，模型组各点有降低趋势，但差异无统计学意义（P>0.05）。与模型组比较，电针组各点有升高趋势，但差异无统计学意义（P>0.05），针刀组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.01）。与电针组比较，针刀组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.01）。见表1。2）肌肉肌腱移行处力-位移值：与空白组比较，模型组各点有降低趋势，但差异无统计学意义（P>0.05）。与模型组比较，电针组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05），针刀組各点升高趋势优于电针组，有极显著性差异（P<0.01）。与电针组比较，针刀组各点有升高趋势，但差异无统计学意义（P>0.05）。见表1、2与图3、4。
2.2.2 半腱半膜肌 1）肌腹处力-位移值：与空白组比较，模型组各点降低趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较，电针组各点有升高趋势，但差异无统计学意义（P>0.05），针刀组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.01）。与电针组比较，针刀组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.01）。见表1。2）肌肉肌腱移行处力-位移值：与空白组比较，模型组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较，电针组及针刀组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。与电针组比较，针刀组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1、2与图3、4。
2.2.3 股直肌 1）肌腹处力-位移值：与空白组比较，模型组各点降低趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较，电针组各点有升高趋势，但差异无统计学意义，针刀组升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。与电针组比较，针刀组各点有升高趋势，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。2）肌肉肌腱移行处力-位移值：与空白组比较，模型组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较，电针组各点有升高趋势，但差异无统计学意义（P>0.05），针刀组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。与电针组比较，针刀组各点有升高趋势，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1、2与图3、4。
2.2.4 腓肠肌 1）肌腹处力-位移值：与空白组比较，模型组各点降低趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较，电针组各点有升高趋势，但差异无统计学意义（P>0.05），针刀组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。与电针组比较，针刀组各点有升高趋势，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。2）肌肉肌腱移行处力-位移值：与空白组比较，模型组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较，电针组及针刀组各点均有升高趋势，但差异无统计学意义（P>0.05）。与电针组比较，针刀组各点有升高趋势，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1、2与图3、4。
3 讨论
KOA多发于中老年人，且导致患者的生命质量严重下降，如果不及时治疗可能导致膝关节变形，甚至残疾。故如何提高KOA患者的治疗效果成为急需研究的课题之一。小针刀疗法中西结合，以其创伤小、操作方便、疗效好等独特的优势，被患者广为接受[8-9]。
针刀疗法通过剥离和疏通局部软组织的粘连、挛缩，从而达到减张减压的目的，最终恢复膝关节的生物力学平衡，从而治疗膝骨关节炎[10]。付达尔丽等[11]通过针刀松解术治疗膝骨性关节炎，结果显示针刀疗法可以改善膝关节的生物力学特性，使其恢复到健康状态，降低过高的肌张力，从而达到治疗疾病的目的。郭长青等[12]研究表明针刀治疗可以松解局部的粘连、挛缩、瘢痕，能直接降低局部软组织的张力，从而达到缓解疼痛的目的。
大量研究表明，KOA所引起的疼痛中，除了骨性退变的原因外，与软组织张力变化也有一定关系。膝关节周围软组织出现粘连、瘢痕、挛缩等病理变化，一部分原因是由于慢性炎性反应刺激或长期劳损产生的，当这种生理代偿超过人体正常承受范围后，就会产生疼痛等病理表现[13]。肌肉是软组织的重要组成部分，是维持膝关节平衡的主要结构，当多种因素导致膝关节周围结构失去平衡后，肌肉等软组织会重新进行力量分配，导致某些位置应力集中，牵拉和压迫周围的神经和血管从而出现疼痛，故肌肉组织在KOA的发病过程中起着重要作用[14]。
但是，以往学者主要观察伸肌与膝骨性关节炎的关系，连晓文等[15]调查发现股四头肌功能下降对膝骨性关节炎的发生和进展有重要影响，故进行股四头肌的功能训练，对于提高膝关节的运动能力，膝骨性关节炎有较好的治疗效果。但对于屈肌研究较少，近年的相关膝关节后部治疗证实了膝屈肌群的重要性，对腘绳肌群及腓肠肌群进行相应训练可以增强关节的稳定性，有效促进骨关节恢复[16]。因此屈肌肌群在KOA发病中的作用同样不可忽视。
故本实验以屈肌肌群为重点干预对象，观察干预后局部膝周软组织张力的变化，为针刀松解法选点提供依据，应用的JZL-Ⅲ型肌张力仪测试200 g压力下的力-位移值，力-位移值与软组织张力成反比，力-位移值大说明软组织张力小，力-位移值小，说明软组织张力大。在生物力学的领域中，也广泛地应用力-位移曲线来反映组织的刚度。吴珍等[17]使用软组织张力测试计进行实验测试，证实针刀松解法可以有效地降低局部软组织张力。权伍成等[18]也使用软组织张力测试计进行实验测试，还证实针刀松解法降低局部软组织张力的效果优于电针。 本实验结果显示，在所有点（股二头肌、半腱半膜肌、股直肌、腓肠肌）处，模型组力-位移值均降低，提示造模后各肌群张力均升高，符合KOA的临床表现。在屈肌肌群（股二头肌和半腱半膜肌）中，电针组较模型组力-位移值均有升高，但肌肉肌腱移行处力-位移值有统计学意义，肌腹处则无。这可能与治疗点集中在肌肉肌腱移行处有关，故肌肉肌腱移行处疗效优于肌腹处。结合临床分析可能因为针刀的针体较粗，且直接作用于粘连的软组织，而传统针灸针体较细，且通过穴位调理，故在减张减压，松解粘连，降低软组织张力等方面针刀组疗效优于电针组，本实验证实针刀干预屈肌肌群治疗KOA，无论对屈肌及伸肌同样有效，为临床干预屈肌肌群治疗KOA提供了依据，为广大医疗工作者选点提供了新的思路，值得借鉴推广。
参考文献
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[17]吴珍.针刀松解术对膝骨性关节炎局部软组织张力及疼痛的影响[J].临床医药文献（连续型电子期刊），2017，4（A3）：20221-20222.
[18]权伍成，张秀芬.针刀松解对膝骨性关节炎的软组织张力变化的影响[J].武警医学，2010，21（11）：945-947.
（2019-06-17收稿 责任编辑：王明）
关键词 针刀;腘绳肌;膝骨性关节炎;膝周肌群;肌张力
Abstract Objective：To investigate the effect of acupotomy loosening hamstring method on tissue tension of knee muscles of rabbits with knee osteoarthritis muscle. Methods：Twenty-eight experimental rabbits were randomly divided into 4 groups：electro-acupuncture therapy group， acupotomy therapy group， model group and blank group， with 7 rabbits per group. After eight weeks of left hind limb extension position modeling method， 1 rat in the blank group and model group were randomly selected for light microscope observation to verify the success of the modeling. After successfully modeling， electro-acupuncture therapy group and acupotomy therapy group were intervened for 3 weeks. Then， the soft tissue tension meter was placed on the muscular abdomen and the muscular tendon transition of the biceps femoris， semitendinosus semimembranosus， rectus femoris， and gastrocnemius muscles， and the force-displacement values was measured respectively. Results：Compared with the blank group， all points in the model group had a decreasing trend， except for the biceps femoris points， the other points had statistical significance （P<0.05）. Compared with the model group， the electro-acupuncture group showed an increasing trend in each point， and the muscular tendon transition of the biceps femoris and semitendinosus semimembranosus was statistically significant （P<0.05）. All points in the acupotomy group were increased， except for the gastrocnemius point （the muscular tendon transition）， other points were statistically significant （P<0.05）. Compared with the electro-acupuncture group， all points in the acupotomy group were increased， except for the biceps femoris （he muscular tendon transition），other points were statistically significant （P<0.05）. Conclusion：acupomoty release hamstring muscle method can effectively reduce the surface tension of the knee muscles.
Keywords Acupotomy therapy; Hamstring; Knee osteoarthritis; Knee muscle group; Muscle tension
中圖分类号：R245文献标识码：Adoi：10.3969/j.issn.1673-7202.2020.12.006 骨关节炎（Osteoarthritis，OA）是以关节退行性改变为主要表现的疾病，其中膝关节的发病率为8.1%，在骨关节炎的发病率中位于首位[1]。膝骨性关节炎（Knee Osteoarthritis，KOA）主要以膝关节疼痛、僵硬为主要表现，后期可能出现关节畸形、功能障碍等，严重影响患者的生命质量[2]。KOA的患者通常出现软组织张力升高的改变，表现为肌肉、韧带、肌腱等软组织局部疼痛、挛缩及膝关节屈伸不利等[3]。但经针刀松解法治疗后患者软组织张力及疼痛感明显降低。故针刀松解法可以有效地减张减压，降低软组织张力，恢复膝关节的生物力学平衡，达到治疗疾病的目的，临床效果确切[4]。膝关节的稳定主要依靠股四头肌来维持，故以往研究侧重于股四头肌与KOA之间的联系，发现股四头肌与KOA的发生、发展关系密切，干预股四头肌可以改善症状，扩大关节活动度从而治疗KOA[5]。但对屈肌肌群研究甚少，屈肌肌群在维持关节稳定性方面与伸肌肌群同样重要，在此处进行治疗可以有效地改善膝关节功能状态，恢复其力学平衡，进而缓解疼痛[6-7]。故本实验以KOA兔为研究对象，探讨针刀松解腘绳肌对膝周肌群表面张力的影响。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物 新西兰雄兔28只（SCXK京2018-0100，北京科宇动物养殖中心），饲养于北京中医药大學良乡大动物房，体质量3.0～3.5 kg每组兔均单笼饲养，标准饲料，自由摄食饮（22±2）℃，湿度40%～60%左右，实验室定期采用紫外线消毒。
1.1.2 试剂与仪器 肌肉缓冲液（南京赛弘瑞生物科技有限公司，批号：3-4612）;4%多聚甲醛（北京化学试剂研究所，批号：P1110）;二甲苯（北京北化精细化学品有限责任公司，批号：2650-17-1）;酒精（北京贞玉民生药业有限公司，批号：B152440P）;1%盐酸（北京华夏蓝筹生物科技有限公司，批号：B62360）;石蜡（北京化学试剂公司，批号：YS1374）;伊红（北京凯瑞基生物科技有限公司，批号：12854）;苏木素（北京百诺威生物科技有限公司，批号：CY13470）;树脂绷带（珠海丽珠医用生物材料有限公司，批号：1560006）;医用高分子固定绷带（苏州可耐特医疗科技有限公司，批号：130101）;华友针刀（北京卓越华友医疗器械有限公司，批号：180602）;肌张力仪（天津明通世纪科技有限公司与中国中医科学院生物力学实验室共同研制生产的M-tone软组织张力仪及测试分析系统，型号：MT-JZL-Ⅲ型）;穴位刺激仪（北京华为产业开发公司，型号：LH202H）;分体包埋机（徕卡公司，德国，型号：EG1150）;切片机（徕卡公司，德国，型号：RM2245）;显微镜（奥林巴斯公司，日本，型号：BX53）;脱水机（樱花科技有限公司，日本，型号：Tissue-TEK VIP6）;捞片仪（徕卡公司，德国，型号：HI1210）;烤片仪（徕卡公司，德国，型号：HI1220）。
1.2 方法
1.2.1 分组与模型制备 将新西兰雄兔随机分为4组：空白组、模型组、电针组、针刀组。每组兔均单笼饲养，标准饲料，自由摄食饮水，室温（22±2）℃，湿度40%～60%左右，实验室定期采用紫外线消毒。造模前将动物禁食10～16 h，然后采用改良后的Videman法左后肢伸直位法造模，将3%戊巴比妥钠溶液耳缘静脉注射麻醉，剂量为30 mg/kg，牵拉其左后肢使其处于完全伸直位，然后将左后肢腹股沟至踝关节区域备皮，用树脂绷带固定其左后肢腹股沟到足踝处，使左后肢处于伸直位，注意足趾处留出位置以观察血流情况，防止出现血流不畅导致肢体坏死的情况用透明胶带将树脂绷带外缘封好，以防兔撕咬破坏，共制动8周。
1.2.2 干预方法 各组干预从拆除树脂绷带1周后开始。1）空白组：不作任何处理，每天正常抓取、捆绑固定。2）模型组：确定造模成功后，每天正常抓取、捆绑固定，不做任何处理。3）电针组：造模成功1周后开始进行治疗，穴位选择：曲泉、委阳、内膝眼和外膝眼。操作方法：将兔固定后，常规针刺，将曲泉与委阳，内膝眼与外膝眼用电针仪分别连接。进行频率2/100 Hz，强度3 mA的疏密波刺激，每次刺激时间20 min左右，2 d治疗1次，共治疗3周。4）针刀组：造模成功1周后，先用龙胆紫将穴位处进行标记，然后常规备皮、消毒、进针，松解2～3下左右出针，用干棉球按压片刻，防止止血。具体操作方法：1）半腱肌、半膜肌肌腱止点进针点操作：术者左手拇指用力按压穴位处，使软组织紧紧贴于骨面上，右手持针刀，刀刃平行于肌腱，刀体垂直于皮肤，紧贴左手按压处刺入，然后松解2～3刀后出针，用干棉球按压片刻防止止血。2）股二头肌肌腱止点进针点操作：同上。3）条索结节点进针点操作：同上。治疗15 min/次，1次/周，共3周。
1.2.3 检测指标与方法 1）HE染色：为验证造模是否成功，在造模结束后的第1天，从空白组及模型组各随机抽出1只兔，采用麻醉过量法将动物立即处死，将其关节腔完全暴露，切断与股骨连接的韧带、半月板以及其他组织，暴露股骨远端软骨，用咬骨钳迅速取下1 cm×1 cm的软骨标本，以0.9%NACL溶液将组织冲洗干净，然后将其固定在4%多聚甲醛溶液72 h。然后将其放入EDTA脱钙液进行脱钙处理，脱水、透明、石蜡包埋，切片机切片（切片6 μm），用二甲苯和梯度酒精脱蜡复水，用苏木素-伊红进行HE染色，然后对样本进行光镜观察，用OLYMPUSBX-53生物显微镜观察损伤部位软骨组织的结构、细胞数量以及潮线的完整性。2）力-位移值：于治疗1周后测量200 g压力下的力-位移值，将家兔仰卧位固定于测试台上，根据上述流程测试肌腹处及肌肉肌腱移行处各点（股二头肌、半腱半膜肌、腓肠肌、股直肌）的力-位移值。JZL-Ⅲ型肌张力仪由数据采集器、传感器及软组织张力分析系统组成。操作流程：首先将数据采集器连接到计算机上固定的USB接口，然后打开软组织张力分析系统的软件，启动程序后，将传感器悬空，点击“零点测试”按钮，程序会显示力、零点位移曲线，将之调到合适范围，然后点击“输入系数”按钮，输入合适的力、位移系数后。点击“开始测试”按钮，再输入文件名保存后即可开始测试。测试过程中，测试者右手握住传感器外壳，垂直对准测试部位，均匀下压2～3 s，放松时均匀放松2～3 s即可。总测试时间为6 s左右，测试完毕后，点击“显示数据图”按钮，即可查看数据，点击“结果分析”按钮，即可查看力-位移曲线。力-位移值与软组织张力呈反比，力-位移值越大，说明软组织张力越小，力-位移值越小，说明软组织张力越大。重复测试3次，取其平均值，为避免人为因素影响，所有测试均有同一测试者完成。空白及模型组测量方法同上。 1.3 统计学方法 采用SAS8.2统计软件进行数据分析，如符合正态分布，则采用单因素方差分析，如不符合正态分布，则采用非参数检验。数据表示均采用均值±标准差（±s）的方式。以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 HE染色 1）正常组兔由上至下可见表浅层、移行层、辐射层和钙化层四层结构，层次分明，结构完整。潮线清晰完整，细胞未出现簇集现象，排列均匀，无血管翳生成。见图1。2）模型组兔膝关节软骨层次难以分清，潮线扭曲断裂甚至消失，在浅层软骨出现了分层剥脱剥脱现象，出现细胞簇集现象。见图2。
2.2 力-位移值
2.2.1 股二头肌 1）肌腹处力-位移值：与空白组比较，模型组各点有降低趋势，但差异无统计学意义（P>0.05）。与模型组比较，电针组各点有升高趋势，但差异无统计学意义（P>0.05），针刀组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.01）。与电针组比较，针刀组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.01）。见表1。2）肌肉肌腱移行处力-位移值：与空白组比较，模型组各点有降低趋势，但差异无统计学意义（P>0.05）。与模型组比较，电针组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05），针刀組各点升高趋势优于电针组，有极显著性差异（P<0.01）。与电针组比较，针刀组各点有升高趋势，但差异无统计学意义（P>0.05）。见表1、2与图3、4。
2.2.2 半腱半膜肌 1）肌腹处力-位移值：与空白组比较，模型组各点降低趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较，电针组各点有升高趋势，但差异无统计学意义（P>0.05），针刀组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.01）。与电针组比较，针刀组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.01）。见表1。2）肌肉肌腱移行处力-位移值：与空白组比较，模型组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较，电针组及针刀组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。与电针组比较，针刀组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1、2与图3、4。
2.2.3 股直肌 1）肌腹处力-位移值：与空白组比较，模型组各点降低趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较，电针组各点有升高趋势，但差异无统计学意义，针刀组升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。与电针组比较，针刀组各点有升高趋势，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。2）肌肉肌腱移行处力-位移值：与空白组比较，模型组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较，电针组各点有升高趋势，但差异无统计学意义（P>0.05），针刀组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。与电针组比较，针刀组各点有升高趋势，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1、2与图3、4。
2.2.4 腓肠肌 1）肌腹处力-位移值：与空白组比较，模型组各点降低趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较，电针组各点有升高趋势，但差异无统计学意义（P>0.05），针刀组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。与电针组比较，针刀组各点有升高趋势，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。2）肌肉肌腱移行处力-位移值：与空白组比较，模型组各点升高趋势明显，差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较，电针组及针刀组各点均有升高趋势，但差异无统计学意义（P>0.05）。与电针组比较，针刀组各点有升高趋势，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1、2与图3、4。
3 讨论
KOA多发于中老年人，且导致患者的生命质量严重下降，如果不及时治疗可能导致膝关节变形，甚至残疾。故如何提高KOA患者的治疗效果成为急需研究的课题之一。小针刀疗法中西结合，以其创伤小、操作方便、疗效好等独特的优势，被患者广为接受[8-9]。
针刀疗法通过剥离和疏通局部软组织的粘连、挛缩，从而达到减张减压的目的，最终恢复膝关节的生物力学平衡，从而治疗膝骨关节炎[10]。付达尔丽等[11]通过针刀松解术治疗膝骨性关节炎，结果显示针刀疗法可以改善膝关节的生物力学特性，使其恢复到健康状态，降低过高的肌张力，从而达到治疗疾病的目的。郭长青等[12]研究表明针刀治疗可以松解局部的粘连、挛缩、瘢痕，能直接降低局部软组织的张力，从而达到缓解疼痛的目的。
大量研究表明，KOA所引起的疼痛中，除了骨性退变的原因外，与软组织张力变化也有一定关系。膝关节周围软组织出现粘连、瘢痕、挛缩等病理变化，一部分原因是由于慢性炎性反应刺激或长期劳损产生的，当这种生理代偿超过人体正常承受范围后，就会产生疼痛等病理表现[13]。肌肉是软组织的重要组成部分，是维持膝关节平衡的主要结构，当多种因素导致膝关节周围结构失去平衡后，肌肉等软组织会重新进行力量分配，导致某些位置应力集中，牵拉和压迫周围的神经和血管从而出现疼痛，故肌肉组织在KOA的发病过程中起着重要作用[14]。
但是，以往学者主要观察伸肌与膝骨性关节炎的关系，连晓文等[15]调查发现股四头肌功能下降对膝骨性关节炎的发生和进展有重要影响，故进行股四头肌的功能训练，对于提高膝关节的运动能力，膝骨性关节炎有较好的治疗效果。但对于屈肌研究较少，近年的相关膝关节后部治疗证实了膝屈肌群的重要性，对腘绳肌群及腓肠肌群进行相应训练可以增强关节的稳定性，有效促进骨关节恢复[16]。因此屈肌肌群在KOA发病中的作用同样不可忽视。
故本实验以屈肌肌群为重点干预对象，观察干预后局部膝周软组织张力的变化，为针刀松解法选点提供依据，应用的JZL-Ⅲ型肌张力仪测试200 g压力下的力-位移值，力-位移值与软组织张力成反比，力-位移值大说明软组织张力小，力-位移值小，说明软组织张力大。在生物力学的领域中，也广泛地应用力-位移曲线来反映组织的刚度。吴珍等[17]使用软组织张力测试计进行实验测试，证实针刀松解法可以有效地降低局部软组织张力。权伍成等[18]也使用软组织张力测试计进行实验测试，还证实针刀松解法降低局部软组织张力的效果优于电针。 本实验结果显示，在所有点（股二头肌、半腱半膜肌、股直肌、腓肠肌）处，模型组力-位移值均降低，提示造模后各肌群张力均升高，符合KOA的临床表现。在屈肌肌群（股二头肌和半腱半膜肌）中，电针组较模型组力-位移值均有升高，但肌肉肌腱移行处力-位移值有统计学意义，肌腹处则无。这可能与治疗点集中在肌肉肌腱移行处有关，故肌肉肌腱移行处疗效优于肌腹处。结合临床分析可能因为针刀的针体较粗，且直接作用于粘连的软组织，而传统针灸针体较细，且通过穴位调理，故在减张减压，松解粘连，降低软组织张力等方面针刀组疗效优于电针组，本实验证实针刀干预屈肌肌群治疗KOA，无论对屈肌及伸肌同样有效，为临床干预屈肌肌群治疗KOA提供了依据，为广大医疗工作者选点提供了新的思路，值得借鉴推广。
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（2019-06-17收稿 责任编辑：王明）