【摘 要】
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应用PCR技术,将人异体移植炎症因子1(hAIF-1)基因cDNA从克隆载体pHFVIH05/AIF-1中扩增,经酶切后与原核表达载体pKK223-3连接,转化大肠杆菌JM109,在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(
【机 构】
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湖南医科大学医学遗传学国家重点实验室
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应用PCR技术,将人异体移植炎症因子1(hAIF-1)基因cDNA从克隆载体pHFVIH05/AIF-1中扩增,经酶切后与原核表达载体pKK223-3连接,转化大肠杆菌JM109,在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后筛选阳性表达株,并对其表达产物进行了分离纯化,得到了电泳纯产品.产物的表观分子质量约1.6×104u,经蛋白质测序N端正确,但C端缺少7个氨基酸残基.在蛋白质一级结构的基础上,利用计算机软件对其蛋白质特征和有关功能作了初步鉴定和预测,对外源基因在原核表达系统中的表达策略作了初步探讨,为hAIF-1的结构和功能研究打下了基础,对于以后用基因工程方法生产该物质,并用于临床具有一定意义.
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