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目的 探讨输尿管上皮种子细胞的分离培养和增殖规律,以及构建种植种子细胞输尿管组织工程网状支架的可行性.方法 采用自制输尿管翻转分离器,分离实验用小型猪输尿管上皮种子细胞.体外培养并鉴定输尿管上皮种子细胞.观察输尿管种子细胞形态变化,噻唑蓝(MTT)比色法检测原代、第3代、第5代和第7代种子细胞增殖特性.后将输尿管种子细胞种植到电纺丝输尿管网状支架,于支架孵育第1、3、5、7、9天检测种子细胞增殖活性,并绘制细胞生长曲线.结果 成功分离培养输尿管上皮种子细胞,角蛋白抗体和尿路上皮特异抗体UroplakinⅡ证实为输尿管尿路上皮细胞.输尿管上皮种子细胞接种24 h基本贴壁,呈多角形团簇样生长,8d时细胞融合70%以上,呈铺路石状排列.输尿管上皮种子细胞在电纺丝输尿管网状支架上生长增殖良好.结论 改良输尿管上皮细胞分离方法可获得大量纯化的输尿管上皮种子细胞,其在输尿管网状支架上生长增殖良好,成功构建输尿管组织工程网状支架有望应用于输尿管损伤替代修复。