细胞色素P4502A13野生型/突变体稳定表达Flp-In^(TM)CHO细胞系的建立

来源 :郑州大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：hygensos

【摘要】

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目的:构建稳定表达细胞色素P4502A13(CYP2A13)野生型(CYP2A13*1)和5种突变体的Flp-InTMCHO细胞系。方法:构建CYP2A13野生型、各突变体的pcDNA5/FRT重组质粒。将pcDNA5-CYP2A1

【作者】

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郑丹丹李靖王永林李勇军刘亭

【机构】

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贵州医科大学基础医学院病理生理学教研室,贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室,贵州医科大学药学院,贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心

【出处】

：

郑州大学学报:医学版

【发表日期】

：

2021年2期

【关键词】

：

细胞色素P4502A13 黄曲霉毒素B1 突变体稳定表达 Flp-InTMCHO细胞 cytochrome P4502A13

【基金项目】

：

国家自然科学基金项目(81603189,U1812403-05),贵州省自然科学基金项目(黔科合基础[2019]1280号),贵州省普通高等学校科技拔尖人才项目(黔教合KY字[2021]033)

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目的:构建稳定表达细胞色素P4502A13(CYP2A13)野生型(CYP2A13*1)和5种突变体的Flp-InTMCHO细胞系。方法:构建CYP2A13野生型、各突变体的pcDNA5/FRT重组质粒。将pcDNA5-CYP2A13*1、*2、*5、*6、*8和*9重组质粒分别转染至Flp-InTMCHO细胞中,用实时荧光定量PCR、Western blot和黄曲霉毒素B1(AFB1)细胞毒性实验检测转染细胞中CYP2A13表达量及其活性,筛选稳定表达CYP2A13野生型和各突变体的Flp-InTMCH

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