【摘 要】
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目的构建重组MICA原核表达载体并探讨MICA对NK细胞毒效应的影响.方法经RT-PCR从Hela细胞获取MICA基因,经适当酶切后构建表达载体pBV220-MICA,转入大肠杆菌DH5 α进行表达.重
【机 构】
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山东省医学科学院基础医学研究所,山东大学药学院
【基金项目】
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国家自然科学基金;山东省自然科学基金
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目的构建重组MICA原核表达载体并探讨MICA对NK细胞毒效应的影响.方法经RT-PCR从Hela细胞获取MICA基因,经适当酶切后构建表达载体pBV220-MICA,转入大肠杆菌DH5 α进行表达.重组MICA蛋白经纯化后与NK92细胞孵育观察对NK细胞毒效应的影响.结果带有重组质粒pBV220-MICA的大肠杆菌经热诱导后,以可溶性形式表达重组MICA蛋白,纯化后的重组MICA蛋白纯度为95%.经重组MICA处理的NK92细胞对MICA表达阳性的肿瘤细胞的杀伤作用明显降低.结论构建了pBV220-MICA重组质粒,并在大肠杆菌中获得可溶性表达,为研究MICA与NK细胞受体的相互作用机制奠定了基础.
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