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目的：探讨EZAL-MY96直投式酸奶发酵剂（DVS）中未知乳杆菌的分子生物学鉴定方法。方法：采用显微观察初步鉴定，利用16SrDNA序列分析方法进一步鉴定，利用NCBI中BLAST数据库对测序结果进行比对，构建系统发育树进行分析，并对菌种进行特异PCR分析。结果：最终确定该未知乳杆菌为德氏乳杆菌保加利亚亚种（lactobacillus delbrueckii subsp.Bulgaricus）。结论：基于16SrDNA序列分析及特异PCR结合的方法可以快速、准确地的鉴定出未知乳杆菌。