猪戊型肝炎病毒Ⅳ型衣壳蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

来源 :畜牧兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xixijeffkol

【摘要】

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为获得猪戊型肝炎病毒（Hepatitis E virus，HEV）IV型衣壳蛋白单克隆抗体，将猪HEV衣壳蛋白的C端267（408-675）个氨基酸基因序列克隆入原核表达载体pET-28a（＋），构建重组质粒pET-28a-ORF2-C，

【作者】

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赵菲菲赵钦胡守彬陈福勇肖一红周恩民

【机构】

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山东农业大学动物科技学院免疫生物学实验室,西北农林科技大学兽医免疫学研究所,中国农业大学动物医学院

【出处】

：

畜牧兽医学报

【发表日期】

：

2012年6期

【关键词】

：

猪戊型肝炎病毒衣壳蛋白单克隆抗体鉴定 swine hepatitis E virus capsid protein monoclonal antibo

【基金项目】

：

山东省“泰山学者”建设工程项目（040-72010）

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为获得猪戊型肝炎病毒（Hepatitis E virus，HEV）IV型衣壳蛋白单克隆抗体，将猪HEV衣壳蛋白的C端267（408-675）个氨基酸基因序列克隆入原核表达载体pET-28a（＋），构建重组质粒pET-28a-ORF2-C，转化E．coli Rosetta（BL21）感受态细胞进行诱导表达，SDS-PAGE和Westernblot鉴定，纯化后免疫小鼠。取免疫小鼠的脾脏与鼠骨髓瘤细胞sPz／0融合制备单克隆抗体。通过间接ELISA和竞争ELISA方法筛选并鉴定单抗。结果表明蛋白得到正确、高效表

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