【摘 要】
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目的对依赖于靶点稳定性的药物亲和反应(DARTS)这一靶标发现新技术进行主要影响因素的探索,获得DARTS更适宜的实验条件。方法采用不同浓度的链霉蛋白酶(酶与蛋白质量比1∶100~1
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目的对依赖于靶点稳定性的药物亲和反应(DARTS)这一靶标发现新技术进行主要影响因素的探索,获得DARTS更适宜的实验条件。方法采用不同浓度的链霉蛋白酶(酶与蛋白质量比1∶100~1∶10 000)对Jurkat细胞提取的蛋白混合物进行室温酶解,通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和考马斯亮蓝染色,观察不同浓度链霉蛋白酶对蛋白混合物酶解的程度,以确定DARTS适宜的酶解浓度范围。在此基础上,以α-酮戊二酸为研究对象,采用DARTS联合SDS-PAGE,考察不同链霉蛋白酶浓度(酶与蛋白质量比为1∶50
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