【摘 要】
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目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染的巨噬细胞对CD8+细胞毒性T淋巴细胞杀伤功能的抵抗作用.方法:从健康人群(n=6)和HBV感染患者(n=6)中获得的肝脏活检组织,采用免疫组化方法检测CD68和HBV核心蛋白(HBc)表达.在体外,从外周血单个核细胞(PBMCs)中分离单核细胞衍生的巨噬细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞,将巨噬细胞和CD4+T细胞暴露于HBV中,并与CD8+T细胞以不同的效应与靶标比率共培养.采用流式细胞术分析HBc+靶细胞的消除、HBV感染巨噬细胞的初始反应和HBV包膜的内化动力
【机 构】
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齐鲁医药学院人体解剖学教研室,山东淄博255213;潍坊市人民医院中心实验室,山东潍坊261041
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目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染的巨噬细胞对CD8+细胞毒性T淋巴细胞杀伤功能的抵抗作用.方法:从健康人群(n=6)和HBV感染患者(n=6)中获得的肝脏活检组织,采用免疫组化方法检测CD68和HBV核心蛋白(HBc)表达.在体外,从外周血单个核细胞(PBMCs)中分离单核细胞衍生的巨噬细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞,将巨噬细胞和CD4+T细胞暴露于HBV中,并与CD8+T细胞以不同的效应与靶标比率共培养.采用流式细胞术分析HBc+靶细胞的消除、HBV感染巨噬细胞的初始反应和HBV包膜的内化动力学.免疫荧光分析HBV包膜与和驻留蛋白不同的细胞内区室[早期内体抗原1(EEA1)、溶酶体相关膜蛋白1(LAMP1)和唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素1(Siglec-1)]共定位情况.结果:在来自HBV感染患者的肝脏样本中观察到HBc和CD68的共定位信号.与感染HBV的CD4+T细胞相比,感染HBV的巨噬细胞显著抵抗CD8+T细胞的杀伤(P<0.05).与CD4+T细胞相比,CD8+T细胞对感染巨噬细胞的反应倾向于产生TNF-α(P<0.01).相对于HBV包膜与HBc共定位,HBV包膜与Siglec-1共定位显著降低(P<0.01),但仍显著高于与EEA1或LAMP1的共定位(P<0.01).结论:HBV感染的巨噬细胞能逃避CD8+T细胞的杀伤作用,这可能与HBV包膜被传递到细胞内含病毒区室有关.
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