论文部分内容阅读
目的
检测前列腺癌中N–myc下游调节基因–1(N–myc downstream regulated gene–1，NDRG1)启动子区的甲基化状态，探讨甲基化转移酶抑制剂5–氮杂胞苷对NDRG1基因在前列腺癌细胞mRNA的表达及对细胞增殖的影响。
方法2013年1月至2014年4月采用亚硫酸盐测序PCR法分别检测前列腺癌组织、良性前列腺增生(BPH)组织、前列腺癌细胞系(PC3、22RV1、LNCaP、DU145)和人正常前列腺细胞系RWPE–1中的NDRG1基因启动子区甲基化状态。用10 μmol/L 5–氮杂胞苷分别作用于LNCaP和DU145细胞72 h后，噻唑盐法分析5–氮杂胞苷对LNCaP和DU145细胞增殖的影响；RT–PCR法检测两种细胞系中NDRG1 mRNA的表达。
结果NDRG1基因在前列腺癌细胞系PC–3、22RV1、LNCaP和DU145中甲基化率分别为(24.8±3.3)%、(36.2±2.5)%、(48.6±2.8)%、(69.5±1.7)%，人正常前列腺细胞系RWPE–1甲基化率为(4.8±4.5)%；前列腺癌组织中为(48.6±5.3)%，BPH组织中为(4.3±2.1)%，组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。10 μmol/L 5–氮杂胞苷处理LNCaP和DU145细胞72 h后，两种细胞中NDRG1基因发生了去甲基化，mRNA表达水平较处理前增强8～9倍，细胞生长受到抑制(P<0.05)。
结论NDRG1基因启动子区的高甲基化是其在前列腺癌中异常表达的原因之一，5–氮杂胞苷能逆转NDRG1基因的甲基化状态，调控该基因mRNA表达，并能抑制前列腺癌细胞的增殖。