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目的以破伤风毒素C片段（TETC）基因为例，探讨区段基因拼接方法。方法根据已知的TETC基因序列（GenBank登记号M12739，367-1719），结合乳链菌氨基酸密码子的基因编码情况，设计适于在乳链菌内表达的TETC基因序列，为进一步克隆，根据同义突变的原理消除序列中的EcoRⅠ和KenⅠ的酶切位点，在TETC基因的5’端加上SalⅠ酶切位点，3′端加上XhoⅠ和Hind Ⅲ酶切位点，序列全长1383bp。将其中1380bp的片段使用DNAstar6．0设计为68条长40bp的寡核苷酸TETC1-T