目的分析肝激酶B1(liver kinase B1,LKB1)对人巨细胞肺癌(the people giant cell lung cancer,PGCL3)细胞增殖、迁移、侵袭的影响及其机制。方法构建真核表达载体p CMV-LKB1,转染人巨细胞肺癌细胞。转染后48h,用免疫印迹法检测各组细胞LKB1蛋白表达水平,明确转染PGCL3效率。转染后每隔12h、连续72h检测LKB1对细胞增殖能力的影响;Transwell小室检测转染后各组细胞迁移、侵袭力。提取各组细胞蛋白检测基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)、雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达水平。结果 p CMV-LKB1经PCR、双酶切及DNA测序鉴定后,证实目的基因片段插入方向正确,核酸序列与NCBI公布的LKB1的核酸序列一致;免疫印迹分析显示,转染p CMV-LKB1的PGCL3细胞中LKB1表达水平明显增高,表明p CMV-LKB1构建成功。增殖曲线分析和5-乙炔基-2,脱氧嘧啶核苷(5-ethynyl-2,-deoxyuridine,Ed U)检测显示,转染p CMV-LKB1能显著抑制PGCL3细胞的增殖;Transwell小室检测显示,过表达LKB1可显著抑制PGCL3细胞的迁移与侵袭;免疫印迹分析显示,过表达LKB1的PGCL3细胞其LKB1下游分子中总m TOR表达量不变,磷酸化m TOR(p-m TOR)水平降低,m TOR下游分子VEGF表达量也显著降低,迁移侵袭相关蛋白MMP2表达无变化,但MMP9水平显著降低。结论 LKB1可能通过下调PGCL3细胞p-m TOR水平,降低VEGF表达,从而抑制巨细胞肺癌细胞增殖,并可能通过下调金属基质蛋白酶MMP9的表达,降低巨细胞肺癌细胞迁移侵袭能力。