【摘 要】
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目的:通过精子低渗肿胀(HOS)实验结合改良伊红染色法观察中草药远志粗提物体外杀精活性及机制。方法:HOS实验结合伊红-姬姆萨(EG)染色(HOS-EG)判断精子膜完整性,将精子分为A(
【机 构】
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山东省计划生育科学技术研究所优生技术重点实验室
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目的:通过精子低渗肿胀(HOS)实验结合改良伊红染色法观察中草药远志粗提物体外杀精活性及机制。方法:HOS实验结合伊红-姬姆萨(EG)染色(HOS-EG)判断精子膜完整性,将精子分为A(HOS+-EG-)、B(HOS-EG-)、C(HOS+-EG+)、D(HOS-EG+)4型。精子染色质扩散实验(SCD)检测精子DNA碎片。制备远志粗提物,并判断其体外杀精子活性。壬苯醇醚-9(N-9)作为标准参照物,生理盐水为对照组。结果:远志粗提物浓度为50.0mg/ml和20.0mg/ml时体外20s内即可完全杀灭精子(与精液1:1混合)。对照组、远志粗提物组及N-9组精子DNA碎片比例各组比较无差异。对照组A、B、C和D型精子百分比分别为(69.0±8.3)%、(3.4±0.5)%、(10.2±1.7)%和(17.4±2.1)%。远志粗提物组及N-9组精子膜完整性全部被破坏,无A型和B型精子,C型精子较对照组明显减少,D型精子比对照组明显增加(P<0.001)。精子复活实验显示远志粗提物组和N-9组均无活动精子恢复。结论:HOS-EG实验可以同时判断一条精子头膜或尾膜损伤。远志粗提物在体外通过破坏精子膜使精子快速失活。
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