【摘 要】
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针对鸡蛋中泰妙菌素的残留问题,通过半抗原及抗原设计合成、动物免疫及细胞融合筛选,成功得到可特异、灵敏识别泰妙菌素的单克隆抗体,并建立了泰妙菌素的化学发光酶免疫分析方法(CLEIA).采用棋盘法结合单因素实验优化策略,确定最佳反应条件为:包被原质量浓度0.26μg/mL,抗体质量浓度0.94μg/mL,反应体系为0.02 mol/L的PBS(pH 7.4)缓冲液,酶标二抗质量浓度及其稀释液和反应时间分别为2μg/mL、PBST和40 min.在该条件下,建立了泰妙菌素的CLEIA方法,其IC50为0.54
【机 构】
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华南农业大学 食品学院 广东省食品质量安全重点实验室,广东 广州 510642;广州市食品检验所,广东 广州 510410;深圳凯吉星农产品检测认证有限公司,广东 深圳 518000
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针对鸡蛋中泰妙菌素的残留问题,通过半抗原及抗原设计合成、动物免疫及细胞融合筛选,成功得到可特异、灵敏识别泰妙菌素的单克隆抗体,并建立了泰妙菌素的化学发光酶免疫分析方法(CLEIA).采用棋盘法结合单因素实验优化策略,确定最佳反应条件为:包被原质量浓度0.26μg/mL,抗体质量浓度0.94μg/mL,反应体系为0.02 mol/L的PBS(pH 7.4)缓冲液,酶标二抗质量浓度及其稀释液和反应时间分别为2μg/mL、PBST和40 min.在该条件下,建立了泰妙菌素的CLEIA方法,其IC50为0.54 ng/mL,检出限(LOD,IC10)为0.03 ng/mL,线性检测范围(IC20～IC80)为0.17～1.74 ng/mL,且与其它功能结构类似物无明显交叉反应,特异性良好.将建立的CLEIA方法用于鸡蛋实际样品的检测,加标回收率为100％～118％,相对标准偏差(RSD)小于10％,结果与HPLC-MS/MS(r2=0.9987)一致,表明该方法适用于鸡蛋样品中泰妙菌素残留的快速筛查.
其他文献
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利用全二维气相色谱-四极杆飞行时间质谱(GC×GC-QTOF MS)建立了一种适用于独活挥发油化学成分的高通量检测方法,样品经水蒸气蒸馏提取后,直接采用全二维气相色谱进行分离,并根据谱库匹配、保留指数及精确质量数进行定性确认.结果表明,共分离鉴定了独活挥发油中207种化学成分,其中正向、反向匹配因子大于800的化合物占90％以上,分子离子峰的精确质量偏差均小于3 ppm,且80％以上物质的保留指数偏差在20以内.同时,通过半定量分析发现酯类、醇类、酚类、碳氢化合物是独活挥发油中最丰富的化学成分.研究结果对
5?甲基胞嘧啶(5?Methylcytosine,5mC)作为DNA中研究最为广泛的表观遗传修饰,不改变基因的序列,但是可以调控基因表达,从而在生命体的生长、发育和疾病发生中发挥着重要作用.研究5mC的分布、变化及作用机制有助于加强对生命体活动本质的理解.阐明基因组DNA中5mC修饰的生物学功能主要依赖于精准破译其在基因组上的位置信息.目前对5mC的定位分析除了经典的亚硫酸氢盐介导的方法之外,也发展了其他多种分析方法,如免疫沉淀富集介导的定位分析、酶介导的定位分析、吡啶硼烷介导的定位分析、纳米孔测序定位分
蛋白质的SUMO(Small ubiquitin-like modifier)化修饰是生物体内一类重要的翻译后修饰,与核转运、转录调控、基因完整性维持和细胞周期调控等重要生物学过程密切相关.然而由于SUMO本身天然丰度低以及氨基酸序列冗长,SUMO化修饰的分析鉴定一直是研究的热点和难点.为实现SUMO化蛋白质组的深度覆盖分析,发展高效的SUMO化蛋白质/肽段的富集方法十分必要.该文对SUMO化蛋白质组不同富集方法的原理、特点以及最新研究进展进行了综述,并对其发展前景进行了展望.
该文以富硒堇叶碎米荠为研究对象,通过酶解法提取其中的硒化合物,采用高效液相色谱-电感耦合等离子质谱(HPLC-ICP-MS)定量分析已知的硒化合物;对于未知的硒化合物,将酶解液经3 kDa超滤离心管浓缩除杂、冻干后,用初始流动相复溶,选取Kinetex F5超高效液相五氟苯基柱(100 mm×2.1 mm,2.6μm),以0.1％(体积分数)甲酸-水溶液和0.1％(体积分数)甲酸-乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱,通过超高效液相色谱-电喷雾电离源高分辨串联质谱(UPLC-ESI-Triple TOF MS),
自顶向下(Top-down)质谱分析方法是将完整蛋白质离子碎片化,从而在分子水平上提供更加精准、丰富的与蛋白质结构相关的生物学信息.该文首次将3μm红外激光与210 nm紫外激光共同引入到傅里叶变换离子回旋共振质谱仪(FT-ICR MS)的分析池中,获得了牛泛素蛋白离子的自顶向下质谱.通过优化两束激光被引入的时间序列,使得蛋白质碎片离子的覆盖率进一步优化.实验发现将两束激光在时间序列上以部分重叠的方式引入时,可以更有效地实现蛋白离子的解离.对于+11价的牛泛素蛋白离子,双光束解离碎片覆盖率可达73％,高于
该文基于硅基纳米材料良好的生物安全性,且形貌、尺寸、比表面积、孔径和功能化均较易调控等优势,构建了一种以适配体为靶点的纳米材料作为载体进行肿瘤细胞内试剂递送,并进行了miRNA的超灵敏检测及药物可控释放.由于表面存在硅烷醇基团,使得硅基纳米材料易于氨基化,进一步提高了药物的治疗效果,减少了副作用.首先制备了55 nm的介孔纳米二氧化硅(MSNs),随后在MSNs的介孔中负载阿霉素(Dox),然后通过静电作用将发夹G-四链体DNA(HG1、HG2)包覆在MSNs上,形成DNA门以防止Dox泄露.当靶标miR
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建立了血液中6种吲唑酰胺类合成大麻素超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检验方法.前处理分别采用沉淀蛋白和固相萃取2种方法,UPLC-MS/MS检测,选用ACQUITY UPLC BEH C18(1.7 μm,2.1 mm ×100 mm)色谱柱,含1 mmol/L甲酸铵的甲酸-水(1∶1000,V∶V)溶液为水相(A相),甲醇为有机相(B相)进行梯度洗脱,采用正离子扫描模式,多反应监测(MRM)模式进行检测.结果 表明,6种合成大麻素的线性范围宽,相关系数均大于0.99,检出限0.01 ～0