【摘 要】
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[目的]研究非小细胞肺癌(NSCLC)患者中转录因子MafB的表达变化,并评估MafB对NSCLC患者CD14+单核细胞分泌Ⅰ型干扰素和诱导CD4+T细胞分化的影响。[方法]入组41例NSCLC患者(28例鳞癌和13例腺癌)和21例健康志愿者。收集外周血和支气管肺泡灌洗液(BALF),分离血浆和外周血单个核细胞(PBMC),纯化CD14+单核细胞和CD4+T细胞。酶联免疫吸附实验检测血浆和BALF
【基金项目】
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国家自然科学基金(81402012); 陕西省卫生健康科研基金(2018A005);
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[目的]研究非小细胞肺癌(NSCLC)患者中转录因子MafB的表达变化,并评估MafB对NSCLC患者CD14+单核细胞分泌Ⅰ型干扰素和诱导CD4+T细胞分化的影响。[方法]入组41例NSCLC患者(28例鳞癌和13例腺癌)和21例健康志愿者。收集外周血和支气管肺泡灌洗液(BALF),分离血浆和外周血单个核细胞(PBMC),纯化CD14+单核细胞和CD4+T细胞。酶联免疫吸附实验检测血浆和BALF干扰素(IFN)-α和IFN-β的水平,反转录实时定量PCR检测外周血和BALF中MafBm RNA相对表达量,Western blot检测MafB蛋白水平。利用MafBsi RNA转染CD14+单核细胞,观察抑制MafB对CD14+单核细胞分泌IFN-α和IFN-β的影响,检测干扰素调节因子3(IRF3)磷酸化水平。建立CD14+单核细胞和CD4+T细胞的直接接触和间接接触培养系统,通过ELISA法检测培养上清中IFN-γ、白细胞介素(IL)-4、IL-17和IL-21表达水平评估抑制MafB对CD14+单核细胞调控CD4+T细胞分化的影响。[结果]血浆IFN-α和IFN-β水平在健康志愿者和NSCLC患者之间差异无统计学意义,但肿瘤部位BALF中IFN-α(242.5±59.98pg/ml vs 282.5±45.24pg/ml,P=0.013)和IFN-β(12.40±2.81pg/ml vs 34.42±7.83pg/ml,P<0.0001)水平均显著性低于非肿瘤部位。PBMC中MafBm RNA相对表达量和蛋白水平在健康志愿者和NSCLC患者之间差异亦无统计学意义,但肿瘤部位BALF中MafB m RNA和蛋白水平则显著性高于非肿瘤部位(P<0.0001)。MafBsi RNA转染可显著性抑制CD14+单核细胞中MafBm RNA和蛋白的表达。MafBsi RNA转染可促进CD14+单核细胞IFN-β的分泌(16.09±5.79pg/ml vs 6.73±1.78pg/ml,P<0.0001),增加IRF3磷酸化(P<0.0001),但对IFN-α表达无明显影响(P>0.05)。而抑制NSCLC患者CD14+单核细胞中MafB对CD14+单核细胞和CD4+T细胞共培养系统中IFN-γ、IL-4、IL-17和IL-21的分泌水平并无显著性影响(P>0.05)。[结论] NSCLC患者肿瘤部位过度表达的MafB可能诱导了Ⅰ型干扰素抑制,但MafB对肿瘤部位CD14+单核细胞的免疫调控功能可能无影响。
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